造血干细胞的基本特性是:①有很强潜能,在一定条件下能反复分裂,大量增殖;但在一般生理状态下,多数细胞处于G0期静止状态。②有多向分化能力,在一些因素的作用下能分化形成不同的祖细胞。③有自我复制能力,即细胞分裂后的子代细胞仍具原有特征,故造血干细胞可终身保持恒定的数量。
造血干细胞学说是60年代初提出的,此后为大量实验证实,是血细胞发生学领域的重大成就。造血干细胞最初是用小鼠脾集落生成实验证实的。实验是将小鼠骨髓细胞悬液输给受致死量射线照射的同系小鼠,使后者重新获得造血能力而免于死亡。重建造血的原因是脾内出现许多小结节状造血灶,称为脾集落(spleen colony)(图5-10)。脾集落内含有红细胞系、粒细胞系、巨核细胞系或三者混合存在。如将脾集落细胞分离后再输给另外的致死量射线照射的同系小鼠,仍能发生多个脾集落,并重建造血。脾集落生成数与输入的骨髓细胞数或脾集落细胞数成正比关系,表明骨髓中有一类能重建造血的原始血细胞。为确定一个脾集落的细胞是否起源于同一个原始血细胞,又将移植细胞经照射后出现畸变染色体,以此作为辨认血细胞发生来源的标志。将此种带标志的细胞输给受照射的小鼠,结果发现,每个脾集落中的所有细胞均具有这种相同的畸变染色体,表明每个集落的细胞是来自一个原始血细胞。每个脾集落为一个克隆(clone),称为脾集落生成单位(colony forming unit,CFU-S),它代表一个造血干细胞。近年还发现,造血干细胞中存在不同分化等级的细胞群体,如髓性造血干细胞可分化为红细胞系、粒细胞巨噬细胞系、巨核细胞系造血祖细胞;淋巴造血干细胞可分化为各种淋巴细胞(彩图5-11)。
图5-10 小鼠脾集落实验
图5-11 血细胞发生
人造血干细胞的存在也有一些间接依据。如慢性粒细胞性白血病患者的红细胞系、粒细胞系和巨核细胞系均具有Ph′畸变染色体,由此推测这三种细胞来自共同的干细胞;又如人骨髓细胞体外培养,出现混合性细胞集落,也表明造血干细胞的存在。医学全.在线提供
2.造血祖细胞由造血干细胞分化为几种不同的造血祖细胞,它们进而再分别分化为形态可辨认的各种幼稚血细胞(图5-11)。造血祖细胞的增殖能力有限,它们依靠造血干细胞的增殖来补充。造血祖细胞可用体外培养的细胞集落法测定。在不同的集落刺激因子(colony stimulating factor,CSF)作用下,可分别出现不同的血细胞集落,目前已确认的造血祖细胞有:①红细胞系造血祖细胞,必需在红细胞生成素(erythropoietin,EPO,由肾等产生)作用下才能形成红细胞集落,又称红细胞集落生成单位(CFU-E)。②中性粒细胞-巨噬细胞系造血祖细胞,需在粒细胞生成素(granulopoietin,由巨噬细胞产生)作用下形成该种细胞的集落,又称粒细胞巨噬细胞系集落生成单位(CFU-GM)。③巨核细胞系造血祖细胞,需在血小板生成素(thrombopoietin)作用下形成巨核细胞集落,又称巨核细胞系集落生成单位(CFU-M)。其在细胞的造血祖细胞的存在,目前尚无确切实验结果。
(三)血细胞发生过程的形态演变
血细胞的发生是一连续发展过程,各种血细胞的发育大致可分为三个阶段:原始阶段、幼稚阶段(又分早、中、晚三期)和成熟阶段。骨髓涂片检查,是血液病诊断的重要依据。
血细胞发生过程中形态变化的一般规律如下:①胞体由大变小,而巨核细胞的发生则由小变大。②胞核由大变小,红细胞的核最后消失,粒细胞的核由圆形逐渐变成杆状乃至分叶,巨核细胞的核由小变大呈分叶状;核内染色质由细疏逐渐变粗密,核仁由明显渐至消失;核的着色由浅变深。③胞质的量由少逐渐增多,胞质嗜碱性逐渐变弱,但单核细胞和淋巴细胞仍保持嗜碱性;胞质内的特殊结构如红细胞中的血红蛋白、粒细胞中的特殊颗粒均由无到有,并逐渐增多。④细胞分裂能力从有到无,但淋巴细胞仍有很强的潜在分裂能力。
1.红细胞发生 红细胞发生历经原红细胞(Proerythroblast)、早幼红细胞(或称嗜碱性成红细胞,basophilic erthroblast)、中幼红细胞(或称多染性成红细胞,polychromatophilic erythroblast)、晚幼红细胞(或称正成红细胞,normoblast),后者脱去胞核成为网织红细胞,最终成为成熟红细胞。从原红细胞的发育至晚幼红细胞大约需3~4天。巨噬细胞可吞噬晚幼红细胞脱出的胞核和其他代谢产物,并为红细胞的发育提供铁质等营养物。各阶段细胞的一般形态特点见表5-1(图5-11)
表5-1 红细胞发生过程的形态演变
发育阶段和名称 |
胞体 |
胞核 |
胞质 | ||||||||
大小(μm) | 形状 | 形状 | 染色质 | 核仁 | 核质比 | 嗜碱性 | 着色 | 血红蛋白 | 分裂能力 | ||
原始阶段 | 原红细胞 | 14~22 | 圆 | 圆 | 细粒状 | 2~3 | > 3/4 | 强 | 墨水 | 无 | 有 |
幼稚阶段 | 早幼红细胞 | 11~19 | 圆 | 圆 | 粗粒状 | 偶见 | >1/2 | 很强 | 墨水蓝 | 开始出现 | 有 |
中幼红细胞 | 10~14 | 圆 | 圆 | 粗块状 | 消失 | 约1/2 | 减弱 | 嗜多染性,红蓝间染 | 增多 | 弱 | |
晚幼红细胞 | 9~12 | 圆 | 圆 | 致密块 | 消失 | 更小 | 弱 | 红 | 大量 | 无 | |
成熟阶段 |
网织红细胞 | 7~9 | 圆盘状 | 无 | 微 | 红 | 大量 | 无 | |||
红细胞 | 7 | 圆盘状 | 无 | 无 | 红 | 大量 | 无 |
2.粒细胞发生 粒细胞发生历经原粒细胞(myeloblast)、早幼粒细胞(又称前髓细胞,promyelocyte)、中幼粒细胞(又称髓细胞,myelocyte)、晚幼粒细胞(又称后髓细胞,metamyelocyte)进而分化为成熟的杆状核和分叶核粒细胞。从原粒细胞增殖分化为晚幼粒细胞大约需4~6天。骨髓内的杆核粒细胞和分叶核粒细胞的贮存量很大,在骨髓停留4~5天后释放入血。若骨髓加速释放,外周血中的粒细胞可骤然增多。各阶段细胞的一般形态特点见表5-2(图-11)。
3.单核细胞发生 单核细胞的发生经过原单核细胞(monoblast)和幼单核细胞(promonocyte)变为单核细胞(图5-13)。幼单核细胞增殖力很强,约38%的幼单核细胞处于增殖状态,单核细胞在骨髓中的贮存量不及粒细胞多,当机体出现炎症或免疫功能活跃时,幼单核细胞加速分裂增殖,以提供足量的单核细胞。
4.血小板发生 原巨核细胞(megakaryoblast)经幼巨核细胞(promegakaryocyte)发育为巨核细胞,巨核细胞的胞质块脱落成为血小板(图5-11)。原巨核细胞分化为幼巨核细胞,体积变大,胞核常呈肾形,胞质内出现细小颗粒。幼巨核细胞的核经数次分裂,但胞体不分裂,形成巨核细胞。巨核细胞呈不规则形,直径40~70μm,甚至更大,细胞核分叶状。胞质内有许多血小板颗粒,还有许多由滑面内质网形成的网状小管,将胞质分隔成许多小区,每个小区即是一个未来的血小板,内含颗粒。并可见到巨核细胞伸出细长的胞质突起沿着血窦壁伸入窦腔内,其胞质未端膨大脱落即成血小板(图5-12)。每个巨核细胞可生成约2000个血小板。
图5-12 人巨核细胞电镜像(上图) ×45000
1.细胞核 2.血小板颗粒 3.滑面内质网
下图示巨噬细胞胞质小块脱落至血窦内
(白求恩医科大学尹昕、失秀雄教授供图)
表5-2 粒细胞发生过程的形态演变
发育阶段和名称 |
胞体 |
胞核 |
胞质 | |||||||||
大小(μm) | 形状 | 形状 | 染色质 | 核仁 | 核质比 | 嗜碱性 | 着色 | 嗜天青颗粒 | 特殊颗粒 | 分裂能力 | ||
幼稚阶段 | 早幼粒细胞 | 11-18 | 圆 | 圆 | 粗粒状 | 偶见 | >1/2 | 很强 | 墨水蓝 | 开始出现 | 有 | |
中幼粒细胞 | 13-20 | 圆 | 圆 | 粗块状 | 消失 | 约1/2 | 减弱 | 嗜多染性,红蓝间染 | 增多 | 弱 | ||
晚幼粒细胞 | 11-16 | 圆 | 圆 | 致密块 | 消失 | 更小 | 弱 | 红 | 大量 | 无 | ||
成熟阶段 |
杆状核粒细胞 | 10-15 | 圆 | 无 | 微 | 红 | 大量 | 无 | ||||
分叶核粒细胞 | 10-15 | 圆 | 无 | 无 | 红 | 大量 | 无 |
阶段和名称 |
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11-18 圆
13-20圆 11-16 圆 10-15 圆 10-15 圆 10-15 圆 |
圆 细网状 2-6 >3/4
卵圆 粗网状 偶见 >1/2 半圆 网块状 消失 约1/2 肾形 网块状 消失 <1/2 带状 粗块状 消失 <1/3 分叶 粗块状 消失 更小 |
强 天蓝 无 无 有
减弱 淡蓝 大量 少量 有 弱 浅蓝 少 增多 有 极弱 浅红 少 明显 无 消失 淡红 少 大量 无 消失 淡红 少 大量 无 |
5.淋巴细胞发生淋巴细胞的发生较复杂。淋巴细胞有多种亚群,它们既有发生育过程,又可因抗原刺激出现小淋巴细胞母细胞化和单株增殖过程,而且还缺乏常规光镜下可见的分化标志,故很难从形态上严格划分淋巴细胞的发生和分化阶段。以往的光镜形态观察,将淋巴细胞的发生传统地分为原淋巴细胞、幼淋巴细胞和淋巴细胞三个阶段,与近年免疫学研究结果尚无明确的关联(详见免疫系统)。