（二)血液检查
血液检查是诊断疟疾、丝虫病的基本方法。涂制血膜用的载玻片用前需经洗涤液处理，自来水、蒸馏水冲洗，在95％酒精中浸泡，擦干或烤干后使用。
洗涤液配制：常用玻璃器皿的洗涤液为铬酸洗液，含工业浓硫酸100ml，重铬酸钾80g，水1000ml。先用冷水将重铬酸钾溶化，然后徐徐加入浓硫酸，同时用玻璃棒搅拌。
1．检查疟原虫
⑴取血与涂片：用75％酒精棉球消毒耳垂，待干后用左手拇指与食指捏着耳垂下方，并使耳垂下侧方皮肤绷紧，右手持取血针、刺破皮肤，挤出血滴。薄、厚血膜可涂制在同一张玻片上（图21－7)。
图21－7 薄厚血膜制作步骤
1)薄血膜制片：在载玻片1／3与2／3交界处蘸血一小滴，以一端缘光滑的载片为推片，将推片的一端置于血滴之前，待血液沿推片端缘扩散后，自右向左推成薄血膜。操作时两载片间的角度为30～45℃，推动速度适宜。理想的薄血膜，应是一层均匀分布的血细胞，血细胞间无空隙且涂血膜末端呈扫帚状。
2)厚血膜制片：载玻片的另一端（右)1／3处蘸血一小滴（约10mm³)，以推片的一角，将血滴自内向外作螺旋形摊开，使之成为直径约0.8～1cm，厚薄均匀的厚血膜。厚血膜为多层血细胞的重叠，约等于20倍薄血膜的厚度。
⑵固定与染色：血片必须充分晾干，否则染色时容易脱落。固定时用小玻棒蘸甲醇或无水酒精在薄血膜上轻轻抹过。如薄、厚血膜在同一玻片上，须注意切勿将固定液带到厚血膜上，因厚血膜固定之前必须先进行溶血。可用滴管滴水于厚血膜上，待血膜呈灰白色时，将水倒去，晾干。在稀释各种染液和冲洗血膜时，如用缓冲液则染色效果更佳。缓冲液的配制如下：
磷酸氢二钠液：磷酸氢二钠（Na2HPO4)无水0.464g或Na2HPO4· 2H2O 11.867g或Na2HPO4 · 7H2O17.872g或Na2HPO4· 2H2O23.877g，蒸馏水1000ml。
M／15磷酸二氢钾液：磷酸二氢钾（Na2HPO4)9.073g，蒸馏水1000ml。
使用时将上述原液按下页表配成不同的pH缓冲液：
| pH | M／15KH2PO4（ml) | M／15Na2HPO4（ml) | 蒸馏水（ml) |
| 6.8 | 4.9 | 5.1 | 90 |
| 7.0 | 6.3 | 3.7 | 90 |
| 7.2 | 7.3 | 2.7 | 90 |
染色时临时配成pH7.0或7.2的缓冲液。
常用的染色剂有姬氏染剂（Giemsa's stain)、瑞氏染剂（Wright's stain)。
1)Giemsa染色法：此法染色效果良好，血膜褪色较慢，保存时间较久，但染色需时较长。
染液配制：姬氏染剂粉1g，甲醇50ml，纯甘油50ml。将姬氏染粉置于研钵中（最好用玛瑙研钵)，加小量甘油充分研磨，加甘油再磨，直至50ml甘油加完为止，倒入棕色玻瓶中。然后分几次用少量甲醇冲洗钵中的甘油染粉，倒入玻瓶，直至50ml甲醇用完为止，塞紧瓶塞，充分摇匀，置65℃温箱内24小时或室温内一周过滤。医学.全在.线www.med126.com
染色方法：用pH7.0～7.2的缓冲液，将姬氏液稀释；比例约为15～20份缓冲液加1份姬氏染液。用蜡笔划出染色范围，将稀释的姬氏染液滴于已固定的薄、厚血膜上，染色半小时（室温)，再用上述缓冲液冲洗。血片晾干后镜检。
2)快速姬色染色法：姬氏染液1ml，加缓冲液5ml，如前法染色5分钟后用缓冲液冲洗，晾干后镜检。
3)Wright染色法：此法操作简便，适用于临床诊断，但甲醇蒸发甚快，掌握不当时易在血片上发生染液沉淀，并较易褪色，保存时间不长。多用于临时性检验。
染液配制：瑞氏染剂粉0.1～0.5g，甲醇97ml，甘油3ml。将瑞氏染剂加入甘油中充分研磨，然后加入少量甲醇，研磨后倒入瓶内，再分几次用甲醇冲洗研钵中的甘油溶液，倒入瓶内，直至用完为止，摇匀，24小时后过滤待用。一般1、2周后再过滤。
染色方法：瑞氏染液含甲醇，薄血膜不需先固定；而厚血膜则需先经溶血，待血膜干后才能染色。染色前先将溶过血的厚血膜和薄血膜一起用蜡笔划好染色范围，以防滴加染液时四溢。滴染液使覆盖全部厚、薄血膜上，30秒至1分钟后用滴管加等量的蒸馏水，轻轻摇动载玻片，使蒸馏水和染液混合均匀，此时出现一层灿铜色浮膜（染色)，3～5分钟后用水缓慢地从玻片一端冲洗（注意勿先倒去染液或直对血膜冲洗)，晾干后镜检。
2．检查微丝蚴
⑴新鲜血片检查：晚间9时至次晨2时取血1滴滴于载玻片上，加盖片，在低倍镜下观察，发现蛇形游动的幼虫后，仍须作染色检查，以确定虫种。
⑵厚血膜检查：厚血膜的制作、溶血、固定与姬氏液染色同疟原虫。但需取血3滴，也可用Delafieid苏木素染色法染色。该染液的配制方法如下：
苏木素1g溶于纯酒精或95％酒精10ml中，加饱和硫酸铝铵（8％～10％)100ml，倒入棕色瓶中，瓶口用两层纱布扎紧，在阳光下氧化2～4周，过滤，加甘油25ml和甲醇25ml，用时稀释10倍左右。
已溶血、固定的厚血膜在德氏苏木素液内染10～15分钟，在1％酸酒精中分色1～2分钟，蒸馏水洗涤1～5分钟，至血膜呈蓝色，再用1％伊红染色0.5～1分钟，以水洗涤2～5分钟，晾干后镜检。
⑶活微丝蚴浓集法：在离心管内装蒸馏水半管，加血液10～12滴，再加生理盐水混匀，离心沉淀3分钟，取沉渣检查。或取静脉血1ml，置于盛有3.8％枸橼酸钠0.1ml的试管中，摇匀，加水9ml，俟红细胞溶化后，离心（3000rpm/min)2分钟，倒去上液，加水再离心，取沉渣镜检。
