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寄生虫学实验诊断技术:病原检查及免疫论断及新技术应用
来源:医学全在线 更新:2007/12/3 字体:

 

  (四)其它器官组织检查

  1.骨髓穿刺 主要检查杜氏利什曼原虫无鞭毛体。一般常作髂骨穿刺,患者侧卧,露出髂骨部位。视年龄大小,选用17~20号带有针芯的干燥无菌穿刺针,从髂骨前上刺后约1cm处刺入皮下,当针尖触及骨面时,再慢慢地钻入骨内约0.5~1.0cm,即可拔出针芯,接上2ml的干燥注射器,抽取骨髓液。取少许骨髓液作涂片;甲醇固定,同薄血膜染色法染色,油镜检。

  2.淋巴结穿刺

  ⑴利什曼原虫:检出率低于骨髓穿刺,但方法简便、安全,且患者经治疗后,淋巴结内原虫消失较慢,故仍有一定价值。一般选腹股沟部,先将局部皮肤消毒,用左手拇指和食指捏住一个较大的淋结,右手取干燥无菌的6号针头刺入淋巴结,此时淋巴结组织液自能进入针内。稍待片刻,拔出针头,将针头内少量的淋巴结组织液注于载玻片上,作涂片染色检查。也可用摘除的淋巴结的切面做涂片,染色后镜检。

  ⑵丝虫成虫:可用注射器从可疑的淋巴结节中抽取成虫,或剖检摘除的结节寻找成虫,也可作病理组织切片检查。

  3.肌肉活检

  ⑴旋毛虫幼虫:用外科手术从患者的腓肠肌或肱或股二头肌取米粒大小的肌肉一块,置于载玻片上,加50%甘油滴,盖上另一载玻片,均匀用力压紧,低倍镜下观察。取下肌肉须立即检查,否则幼虫变得模糊,不易检查。

  ⑵猪囊尾蚴:摘取肌肉内的结节,剥除外层纤维被膜,在2张载玻片间压平、镜检。也可经组织固定后作切片染色检查。

  4.皮肤 检查疥螨,蠕形螨,利什曼原虫等。

  ⑴疥螨:参看“疥螨和疥疮”!一节。
 ⑵蠕形螨:参看“蠕形螨和蠕形螨病”一节。
 ⑶利什曼原虫:在皮肤上出现丘疹和结节等疑似皮肤型黑热病患者,可选择皮损较明显之处,作局部消毒,用干燥灭菌的注射器,刺破皮损处,抽取组织液作涂片;或用消毒的锋利小剪,从皮损表面剪取一小片皮肤组织,以切面作涂片;也可用无菌解剖刀切一小口,刮取皮肤组织作涂片。以上涂片均用瑞氏或姬氏染液染色。如涂片未见原虫,可割取小丘疹或结节,固定后,作组织切片染色检查。

  5.直肠粘膜 用直肠镜从直肠粘膜病变组织内可查见日本血吸虫卵及溶组织阿米巴滋养体。

  日本血吸虫卵:用直肠镜自直肠取米粒大小的粘膜一块,经水洗后,放在2载玻片间,轻轻压平,镜检。虫卵鉴别见表21。-3。

表21-3 粘膜内血吸虫卵未染色之鉴别

活卵 近期变性卵 死卵(钙化卵)
颜色 淡黄至黄褐色 灰白至略黄色 灰褐色至棕红
卵壳 较薄 薄或不均匀 厚而不均匀
胚膜 清楚 清楚 不清楚
内含物 卵黄细胞或胚团或毛蚴 浅灰色或黑色小点或折光均匀的颗粒或萎缩的毛蚴 两极可有密集的黑点含网状结构或块状物

  溶组织阿米巴:用乙状结肠镜观察溃疡形状,自溃疡边缘或深层刮取溃疡组织,置于载玻片上,加少量生理盐水,盖上盖片,轻轻压平,立即镜检。也可取出一小块病变的粘膜组织,固定切片,染色检查。

  6.肺组织 检查卡氏肺孢子虫包囊。取一小块肺组织作涂片,自然干燥后甲醇固定,用改良银染色法进行染色。

  改良银染色法染色步骤:

  1.将肺涂片置于5%铬酸,氧化15分钟,温度为20℃。氧化后的标本均从流水冲洗数秒。
2.1%亚硫酸氢钠经1分钟,自来水冲洗后,蒸馏水洗涤3~4次。
3.放入四胺银工作液内,并在60℃孵育约90分钟,至标本转至黄褐色为止。流水、蒸馏水各洗5分钟。
4.0.1%氯化金2~5分钟,蒸馏水洗4~5次。
5.2%硫代硫酸钠5分钟,流水至少洗10分钟。
6.亮缘复染45秒。
7.95%,99%,100%乙醇逐级脱水。
8.二甲苯透明3次,树胶封片。

  染色结果显示,卡氏肺孢子虫包囊呈圆形、卵圆形或不规则的多角形,囊壁为淡褐色或深褐色。红细胞为淡黄色,其余背景呈淡绿色。

(陈佩惠 姜洪杰)

 

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