最初的聚合酶链反应是用DNA聚合酶I的Klenow片段或T4DNA聚合酶催化的。但是由于每轮反应都需要三个温度点，尤其是模板变性需在较高的温度下进行，所以最初的PCR需要在每轮反应中加入DNA聚合酶。这个问题在发现了耐热DNA聚合酶（Taq DNA聚合酶)后才得以完满的解决。Taq DNA聚合酶分离自水栖高温菌，其最适反应温度为75-80摄氏度，且经90摄氏度以上的加温后仍可在温度恢复后复性。所以这种酶特别适合于在不同温度点进行循环加温与降温而不丧失酶的活性。因此被广泛应用于各种PCR。
图23-1 RCP的基本原理
下面以爱滋病的临床检测为例，简要说明一下PCR在病毒感染的基因诊断中的应用。
组织中总RNA的提取
↓
利用反转录酶合成cDNA
↓
PCR反应：
反应液组织：反应缓冲液
↓
↓模板（上述合成的cDNA)
↓
底物（dATP,dGTP,dCTP,dTTP)
引物（爱滋病病毒特异性引物)
TaqDNA聚合酶 50μl
循环：95℃，30sec（变性)
↓
55℃，1min（退火) 30循环
↓
72℃，1min（聚合)
检测：电泳或核酸杂交
