八、肝细胞膜抗体（Antibody to the hepatocyte membrane, HMA)的检测
Lee等用Rouin氏液固定的大白鼠肝切片作抗原，作间接免疫荧光（IIF)检查，在慢性活动性肝炎（CAH)病人血清中成功的发现了HMA，肝细胞膜呈现黄绿色荧光，12例CAH中11例HMA阳性（93%)10例原发性胆汁性肝硬化（PBC)全部阳性，20例胶元-血管疾病1例阳性（5%)7例非免疫肝病中1例阳性（14%)，正常人22例中仅1例阳性（5%)。
Bouin氏液固定大白鼠肝冰冻切片和IIF检查HMA的方法很简便，特异，对于诊断CAH和PBC，研究病因是很有价值的。
免疫荧光方法：取Wistar大白鼠复合组织（胃窦、肾皮质和髓质和肝)用恒冷箱冷冻切片机作冰冻切片，4μm厚，贴于玻片上，在空气中干燥至少30min。在室温中用Bouin氏液（75ml饱和苦味酸溶液，24ml甲醛，19ml冰醋酸)固定10min。切片在pH7.40.01mol/L PBS中洗3次，15min，同时搅拌，切片在空气中干燥后立即应用，或存放在-20℃备用。作间接免疫荧光染色。
表15-5 平滑肌抗体在不同疾病中的百分率
| 临床诊断 | 例数 | % |
| SLE | 61 | 9.8 |
| 急性肝炎 | 150 | 26.9 |
| 慢性迁延性肝炎 | 14 | 64.28 |
| 慢性活动性肝炎 | 50 | 80.2 |
| 肝硬化 | 32 | 34.3 |
| 肝黄萎缩 | 4 | (全部阳性) |
| 慢性肝炎 | 154 | 54.2 |
| HBsAg阳性携带者 | 12 | 41.7 |
| 甲状腺机能亢进 | 114 | 18.4 |
| 慢性萎缩性胃炎 | 37 | 13.5 |
| 慢性气管炎 | 382 | 15.7 |
| 类风湿性关节 炎 | 12 | 11.1 |
| 皮肌炎 | 11 | 36.4 |
| 肝癌 | 9 | 11.1 |
| 肾小球肾炎 | 18 | 22.0 |
| 心肌炎 | 107 | 18.7 |
| 冠心病 | 247 | 10.1 |
| 糖尿病 | 37 | 27.1 |
| 甲状腺炎（桥本氏) | 8 | 37.5 |
| 正常对照 | 236 | 9.7 |
九、线粒体抗体（Mitochondrial antibody, AMA)
用人肾（新鲜手术或尸检6h以内)采用肾皮质或大白鼠肾脏冰冻切片不需任何固定，作检查AMA抗体的抗原底物，间接免疫荧光结果可见远端肾小管上皮细胞浆呈现均匀的荧光。Walker等（1965)首先用此法在原发性胆汁性肝硬化，隐原性肝硬化和慢性活动性肝炎中发现AMA，以原发性胆汁性肝硬化（158例/188例)阳性率最高（84%)，由于阻塞性肝胆疾病不产生这种抗体，可作鉴别诊断的指标。
这种抗体可以是IgG，IgM及IgA，无组织和器官特异性。
Klarskin等（1972)，Walker等（1970，1972)，对于这种抗体的临床应用进一步作了证实。AMA对疾病的发生的作用尚不明确，有人认为不起作用，有人则认为是造成肝细胞胆小管细胞进行性破坏的自身免疫过程的一个标志。而这两种细胞受累的程度将决定性地导致原发性胆汁性肝硬化。慢性活动性肝炎和隐原性肝硬化33例中阳性率为60%，233例门脉性肝硬化和332例病毒性肝炎中未查出AMA。Vandell等对106例B型萎缩性胃炎患者检查AMA全部阴性。我们很少见到AMA阳性的原发性胆汁性肝硬化病例。
表15-6 AMA亚类及其临床意义
| AMA亚类 | 临床意义 |
| 抗M1 | 梅毒 |
| 抗M2 | PBC（原发性肝硬化)混合型CAH（慢性活动性肝炎)-PBC |
| 抗M3 | 假性红斑狼疮综合征 |
| 抗M4 | 混合CAH-PBC |
| 抗M5 | 原发性非肝性自身免疫性疾病 |
| 抗M6 | 异烟酰异丙肼所致肝炎 |
由表15-6可以看出，AMA不同亚类所对应的抗原存在的差异，其病理意义也各不相同。原发性胆汁性肝硬化患者血清中主要检出抗M2型AMA，抗原位于线粒体内膜。
