免疫活性细胞组成人体免疫系统组织、器官,是维持人体内外环境稳定,消除体内外抗原性物质之危害,起着免疫监视作用,是当代重视和研究地十分深入的领域。免疫活性细胞主要包括淋巴细胞、单核/巨噬细胞及网状细胞等。它们产生的肿瘤—恶性淋巴瘤,是预后差的一类肿瘤,其形态与分型十分复杂。由于淋巴网状组织学及功能的特殊性等因各种抗原性刺激而引起的淋巴网状组织反应性增生(Reactive Hyperplasia, RH)、改变复杂,其与恶性淋巴瘤在组织学方面鉴别很困难,误诊率可达10%~30%,是临床病理诊断中的难题。由于免疫细胞化学,分子生物学的发展,已有可能利用单克隆抗体(McAb)或多克隆抗体(PcAb)和IgH,TCR(T细胞受体)基因重排检测技术,将免疫活性细胞及其肿瘤细胞的细胞系及分化期、亚型、淋巴瘤良、恶性进行鉴别诊断。免疫细胞化学技术简单易行,具有一定的特异性。且可在组织原位标记。并可用于印片或细胞悬液,配合流式细胞仪,提供更为精细的信息。目前市场供应的McAb 与PcAb可已有百种。国际统一称之为CD系列。已往还有OKT系列和Leu系列。但仍有不足的一面,所有抗体在特异性,表达率均有不足。而且在良、恶性的鉴别作用更是有限。
一、免疫活性细胞的免疫细胞化学
(一)B淋巴细胞
B淋巴细胞从骨髓干细胞到分化成熟称为非抗原依赖期。成熟B小淋巴细胞受到抗原刺激后可产生增殖衍化,演变成浆细胞合成分泌Ig。B淋巴细胞存在细胞表面Ig(SIg)及细胞内Ig(CIg)。人们利用SIg 与CIg作为抗原制成许多标记抗体。SIg标记只存在于次成熟的转化淋巴细胞。且多数为IgM·G,而幼稚的前B淋巴细胞与浆细胞缺乏SIg标记。目前较常用的SIg标记McAb有CD19,CD20,CD22,需冰冻切处新鲜组织,而L26则可用于石蜡切片。后又增加LN—1,LN-2,LN-3,MB-1,MB-2及4KB5等石蜡切片标记抗体。称它们为全B抗体。
Cig可分Ig重链包括IgM、Igg IgA、IgD、IgE5种,轻链λ、k两种,CIg标记抗体表达在愈成熟的B淋巴细胞,幼稚者则阴性。在不同部位组织其表达也不一致。如淋巴结生发中心B细胞表达IgD,而肠粘膜淋巴组织中的生发中心B淋巴细胞则表达IgA。上述IgH、L抗体在一些因素的影响下,真正表达率只有75%左右,而且如巨噬组织、R-S细胞等可以吸收血浆中的Ig而出现假阳性。
表12-2 介绍了淋巴细胞分化各阶段的部位、免疫表型和相关肿瘤,请参阅。
表12-2 B淋巴细胞分化各阶段细胞的部位、免疫表型和相关肿瘤