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免疫活性细胞及其肿瘤的免疫细胞学
来源:医学全在线 更新:2007/12/3 字体:

 

  (三)恶性淋巴瘤的免疫细胞分型

  淋巴瘤分型对病人预后的估计,临床治疗有指导性意义。但这不如良恶性鉴别重要。在日常外检中进行淋巴瘤分型,应挑选针对性强、特异性高、使用方便的标记抗体。如有条件的单位以新鲜组织冰冻切片标记、阳性率高。一般单位病理科则选用石蜡切片标记抗体。目前比较常用而效果稳定的石蜡切片标记抗体有L26(全B,除浆细胞瘤)UCL1(全T )KP1或Mac387组织细胞标记。T淋巴瘤应用CD4与CD8标记区别辅助T或抑制T。

  以上为NHL标记分型。关于HD的R-S细胞标记。R—s 细胞的发生组织细胞至今尚未完全肯定、R—S细胞标记抗体最先应用LeuM1(CD15)抗体,它对HD—LPL—H型R—S细胞不标记。且对粒细胞、T细胞、单核/巨噬细胞,甚至上皮细胞也阳性。最近由体外培养的R—S细胞提取抗原制成的Ki-1McAb、对所有类型的R—S细胞均为阳性表达。但对活化的T或B淋巴细胞亦阳性。且需作冰冻切片染色。而可在石蜡切片表达的Ber—H2抗体问世,就解决了困难问题。

  (四)在恶性淋巴瘤免疫表型分析中的注意事项

  为了正确应用免疫细胞化学标记手段在恶性淋巴瘤诊断,分型等方面发挥更大的作用应注意下列问题:①免疫细胞化学在恶性淋巴瘤分析中应紧密结合组织学改变,有目的地选用高效、广谱的抗体,淋巴瘤常用标记抗体见表12-4。因为免疫细胞化学的结果受到多种因素的影响,可以出现假阳性或假阴性;②为了避免因抗体标记的局限性而造成漏诊,有条件的单位最好一次用同功能的几种抗体,这样可以起来抗体间的反应互补性,往往比单项抗体的标记率高;③标本固定要及时,应用中性福尔马林液或B5固定液,则抗原保存要好一些。尽可能应用低压,低温(60以下)浸蜡,减少抗原的破坏丢失;④抗体的浓度要适当,消除背景染色。加用二甲砷酸钠可除去背景着色。特别膜标记阳性时与背景着色很难区分。前者包绕细胞呈环状;⑤每次染色应有阳性对照和阴性对照;⑥目前淋巴瘤的基因重排检测技术已经建立。特别是多聚酶链反应(PCR)扩增技术的应用,提供了特异(无假阳性),敏感(可检测出1/100万瘤细胞)快速(当天可出报告)的淋巴瘤检测手段。作者科室已建立了该项技术。虽然其设备条件要求比较高。可作为疑难、早期、化疗后残留病灶病例的确诊。

表12-4 淋巴瘤常用标记抗体

CD 常用名称 抗原
分子量(kD) 反应细胞
CD1 T6,OKT6,Leu6 45 胸腺细胞/Langerhans细胞
CD2 T11,OKT11,Leu5 50 全T(E花结受体)
CD3 T3,OKT3,Leu4 19~29 全T(T受体相关)
CD4 T4,OKT4,Leu3 55 T辅助(NHc II类)
CD5 T1,OKT4,Leu1 67 全T,偶B
CD6 T12,TU33 120 全T,偶B
CD7 CDLeu9,TU14,EA1 41 全T
CD8 T8,OKT8,Leu2 32 T抑制(TMHc I类)
CD9 J2,BA2 24 T,B,髓细胞
CD10 J5,BA3,ViLA1 100 前,B前,生发中心(CALLA)
CD11 MO1,E11,MY8 94~155 髓细胞,单核细胞
CD13 MY7(MCS—2 ) 160 髓细胞,单核细胞
CD14 Mo2,MY4,UCHM1 55 髓细胞,单核细胞
CD15 LeuM1※,,anti X-Hapten - 粒细胞,单核细胞,R-S细胞,上皮细胞
CD19 B4 95 全B(不包括浆细胞)
CD20 B1 35 全B(不包括浆细胞)
CD21 B2 145 生发中心,套区和周围血B滤泡树突细胞
CD22 Leu14(To15),SHCL1 135 全B
CD23 TU1,Blast2 45  套区,?生发中心B,不包括周围血
CD24 BA1 45,55,65  全B,粒细胞,浆细胞
CD25 TAC  55 活化T和B(IL2受体)
CD30 Ki—1  90~110 R-S细胞,活化T和B
CD33 MX9  67 髓细胞,单核细胞
CD34 MY10,3C5  115 成髓细胞
CD45 LCA,T29/33, PD7/26  220 白血细胞共同抗原(T,B,M)
CD45R UCHL1   全T
  X4KB5   全B
- TdT - 前B和前T,皮质胸腺细胞
- L26   全B
- HLA—DR (Ia-Like) - 全B(不包括浆细胞)活化T(MHc II 类)

  ※可用石蜡切片标记的McAb

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