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免疫荧光细胞化学荧光显微镜检查法
来源:医学全在线 更新:2007/12/3 字体:

 

  (二)滤色系统

  滤色系统是荧光显微镜的重要部位,由激发滤板和压制滤板组成。滤板型号,各厂家名称常不统一。滤板一般都以基本色调命名,前面字母代表色调,后面字母代表玻璃,数字代表型号特点。如德国产品(Schott)BG12,就是种蓝色玻璃,B是蓝色的第一个字母,G是玻璃的第一个字母;我国产品的名称已统一用拼音字母表示,如相当于BG12的蓝色滤板名为QB24,Q是青色(蓝色)拼音的第一个字母,B是玻璃拼音的第一个字母。不过有的滤板也可以透光分界滤长命名,如K530,就是表示压制滤长530nm以下的光而透过530nm以上的光。还有的厂家的滤板完全以数字命名,如美国Corning厂的NO:5-58,即相当于BG12。

  用于荧光显微镜的主要滤板如表3-1。

表3-1 荧光显微镜常用滤板型号和透光特点

基本色调 相应名称 2mm厚透光范围(峰值)nm
上海电器元件厂 德国(Schott) 苏联 日本
黑紫 ZWB-1 UG-1 yΦC-2 DV-1 300~400(365)
黑紫 ZWB-2 UG-5 yΦC-1   280~240(360)
靛蓝 ZB-2 BG-1 ΦC-1 BG-1 300~500(380)
靛蓝 ZB-3 BG-3 CC-4 BG-3 260~520(400)
靛蓝 QB-24 BG-12 CC-8 BG-12 310~570(420)
淡蓝 QB-10 BG-38 C3C-5   310~720(460)
  QB-12   -8    
      -11    
橙黄 CB-3 OG-1(K530) OC-11 OG-1 530以上
橙黄 JB-8 OG-4(K510) ЖC-18 FY-5 510以上
绿橙 JB-7 GG-11(K490) ЖC-17 FY-3 480以上
        FY-4  
淡绿 JB-4 GG-3(K430) жC-11 US-10 420以上

  引自:五九一节 五部队编:荧光显微术,见参考资料)

  1.激发滤板  根据光源和荧光色素的特点,可选用以下三类激发滤板,提供一定波长范围的激发光。

  紫外光激发滤板:此滤板可使400nm以下的紫外光透过,阻挡400nm以上的可见光通过。常用型号为UG-1或UG-5,外加一块BG-38,以除去红色尾波。

  紫外蓝光激发滤板:此滤板可使300~450nm范围内的光通过。常用型号为ZB-2或ZB-3,外加BG-38。

  紫蓝光激发滤板:它可使350~490nm的光通过。常用型号为QB24(BG12)。

  最大吸收峰在500nm以上者的荧光素(如罗达明色素)可用蓝绿滤板(如B-7)激发。

  近年开始采用金属膜干涉滤板,由于针对性强,波长适当,因而激发效果比较玻璃滤更好。如西德Leitz厂的FITC专用KP490滤板和罗达明的S546绿色滤板,均远比玻璃滤板效果好。

  激发滤板分薄厚两种,一般暗视野选用薄滤板,亮视野荧光显微镜可选用厚一些。基本要求是以获得最明亮的荧光和最好的背景为准。

  2.压制滤板 压制滤板的作用是完全阻挡激发光通过,提供相应滤长范围的荧光。与激发滤板相对应,常用以下3种压制滤板:

  紫外光压制滤板:可通过可见光、阻挡紫外光通过。能与UG-1或UG-5组合。常用GG-3K430或GG-6K460。

  紫蓝光压制滤板:能通过510nm以上滤长的荧光(绿到红),能与BG-12组合。通常用OG-4K510或OG-1K530。

  紫外紫光压制滤板:能通过460nm以上波长的荧光(蓝到红),可与BG-3组合,常用OG-11K470AK 490,K510。

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