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常用贮存液的配制
来源:医学全在线 更新:2007/12/3 字体:

 

  17.1mol/L乙酸镁溶液

  【配制方法】

  在800ml水中溶解214.46g四水乙酸镁,用水定容至1L过滤除菌。

  18.1mol/L MgCl2溶液

  【配制方法】

  在800ml水中溶解203.4g MgCl2·6H2O,用水定容至1L,分装成小份并高压灭菌备用。

  【注意】

  MgCl2极易潮解,应选购小瓶(如100g)试剂,启用新瓶后勿长期存放。

  19.β-巯基乙醇(BME)溶液

  【配制方法】

  一般得到的是14.4mol/L溶液,应装在棕色瓶中保存于4℃。

  【注意】

  BME或含有BME的溶液不能高压处理。

  20.NBT溶液

  【配制方法】

  把0.5g氯化氮蓝四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃。

  21.酚/氯仿溶液

  【配制方法】

  把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/L Tris·HCl(pH7.6)抽提几次以平衡这一混合物,置棕色玻璃瓶中,上面覆盖等体积的0.01mol/l Tris·HCl(pH7.6)液层,保存于4℃。

  【注意】

  酚腐蚀性很强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜,穿防护服。所有操作均应在化学通风橱中进行。与酚接触过的部位皮肤应用大量的水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。

  22.10mmol/L苯甲基磺酰氟(PMSF)溶液

  【配制方法】

  用异丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml(10mmol/L),分装成小份贮存于-20℃。如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液(100mmol/L)。

  【注意】

  PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。

  PMSF在水溶液中不稳定。应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。pH值为8.0时,20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为85min,这表明将PMSF溶液调节 为碱性(pH>8.6)并在室温放置数小时后,可安全地予以丢弃。

  23.磷酸盐缓冲溶液(PBS)溶液

  【配制方法】

  在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,用HCl调节 溶液的pH值至7.4加水定容至1L,在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌20min。保存于室温。

  24.1mol/L乙酸钾(pH7.5)溶液

  【配制方法】

  将9.82g乙酸钾溶解于90ml纯水中,用2mol/L乙酸调节 pH值至7.5后加入纯水定容到1L,保存于-20℃。

  25.乙酸钾溶液(用于碱裂解)

  【配制方法】

  在60ml 5mol/L乙酸钾溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml水,即成钾浓度为3mol/L而乙酸根浓度为5mol/L的溶液。

  26.3mol/L乙酸钠(pH5.2和pH7.0)溶液

  【配制方法】

  在80ml水中溶解408.1g三水乙酸钠,用冰乙酸调节 pH值至5.2或用稀乙酸调节 pH值至7.0,加水定容到1L,分装后高压灭菌。

  27.5mol/L NaCl溶液

  【配制方法】

  在800ml水中溶解292.2g NaCl加水定容至1L,分装后高压灭菌。

  28.10%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液

  【配制方法】

  在900ml水中溶解100g电泳级SDS,加热至68℃助溶,加入几滴浓盐酸调节 溶液的pH值至7.2,加水定容至1L,分装备用。

  【注意】

  SDS的微细晶粒易扩散,因此称量时要戴面罩,称量完毕后要清除残留在称量工作区和天平上的SDS,10%SDS溶液无须灭菌。

  29.20×SSC溶液

  【配制方法】

  在800ml水中溶解175.3g NaCl和88.2g柠檬酸钠,加入数滴10mol/l NaOH溶液调节 pH值至7.0,加水定容至1L,分装后高压灭菌。

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