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 医学全在线 > 理论教学 > 基础学科 > 免疫细胞与核酸分子杂交 > 正文
全血细胞培养染色体技术常用试剂配制
来源:医学全在线 更新:2007/12/3 字体:

 

  10.RNA酶A(Sigma)

  (1)储备液

  称取RNA酶A 1g溶于100ml醋酸钠中,置沸水中煮10min,分装后储于-20℃。

  (2)工作液

  用储备液按1:100稀释。

  11.20×SSC

  NaCl            175g

  柠檬酸三钠         88g

  dH2O           1000ml

  固定试剂溶解后,dH2O定容至1000ml,调pH至7.4,高压灭菌。

  12.杂交液(高深度,HMmix)

  去离子甲酰胺          6.0ml

  100×Denhardt’s液      1.0ml

  50%硫酸葡聚糖         2.0ml

  1%人或鲑精DNA

  20×SSC

  ※:临用前加入,终浓度为100~200μg/ml。

  该液为高浓度杂交液, 存于4℃。

  13.PBT液

  BSA            5%

  Triston X-100/(PBS)   0.1%

  注:BSA液用前应用Whatman 3mm滤纸过滤。

  14.抗生物素(α-生物素)单克隆抗体

  用PBT液1:100稀释。

  该单抗现可从英国Dako公司购得。

  15.金(10~20nm)标羊抗兔二抗

  用PBT液1:50稀释。

  16.银溶液(Janesen)

  17.Hoedst 33258(Sigma)

  储备液(100×)

  Hoedst染料           5mg

  甲醇              10ml

  工作液:用2×SSC 1:100稀释储备液。

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