四、LB培养基
（一)液体LB培养基（Luria-Bertani培养基)
配制：取一1000ml的烧杯，将事先称取好的试剂加入杯内，加H2O约500～800ml搅拌使其溶解完全。用5N的NaOH调pH至7.0,加入H2O定容至1000ml。15磅高压灭20min。
（二)琼脂糖平板培养基
细菌培养用琼脂（或琼脂糖) 15g
液体培养基（如LB) ～1000ml
按浓度比例，将琼脂加入液体培养基（如LB)中，稍加搅拌，用纱布或纸封好瓶口，15磅高压灭菌20min。
五、小量质粒提取主要液体
1．溶液Ⅰ
2．溶液Ⅱ
3．溶液Ⅲ（3mol/L醋酸钠)
加热溶解后，再用冰醋酸（约40ml)调pH至4.8，补足H2O至200ml。
六、杂交前处理
1．蛋白酶（Proteinawe K, Pro.K) 蛋白酶K主要用于杂交前标本处理，其作用是使组织达到一定消化，利于检测分子的穿透，从而提高检测方法的敏感性，但各种组织在不同条件下消化程度不一，因此，具体应用时，应根据组织种类、温度确定反应时间及酶的浓度。过度消化可使组织形态结构遭到明显破坏，核酸分子也会受到影响。通常是将其配成储备液（1mg/ml)，临用前，再配成工作液（约0.025mg/ml)。配制方法：
精心称药，将二者充分混合后，分装成小份，-20℃存放，用时再取出冻融，余者弃去。
（2)工作液（临用前配)：
取储备液（1mg/ml)按1：40稀释，充分混合，即得约含Pro.K为25mg/ml的工作液。
（3)关于P-K缓冲液的配制：
称取上述试剂，充分混合即可。
②1mol/L 的Tris-HCl(pH8.0)：
先将Tris于800ml ddH2O中溶解，用HCl将pH调至8.0,ddH2O定溶于1000ml，高压灭菌，室温备用即可。
③0.5mol/L的EDTA：
称取EDTA溶于约600ml ddH2O中，常需60℃持续搅拌以助溶，滴加NaOH至pH接近8.0时，EDTA才开始溶解。待完全溶解后，冷却至室温，NaOH调pH至8.0,ddH2O定溶至1000ml，高压灭菌，室温备用。
2．甘氨酸
（1)1mol/L甘氨酸：
称取甘氨酸75g溶于ddH2O或DEPC水中，最后补足ddH2O定容至1000ml，高压灭菌备用。该液为储备液，-20℃储存。
（2)甘氨酸工作液（0.1mol/L)：
将二者按1：10比例稀释，即得甘氨酸工作液。一般要求临用前新鲜配制。
甘氨酸有终止蛋白酶K作用的作用，以防过度消化。
3．0.25%醋酸-0.25%醋酸酐
配制：按上述配方，先以少许DEPC水溶解NaCl，然后加入三乙醇胺及浓HCl。DEPC水定容至约1000ml(997.5ml)，临用前，一边摇动溶液一边加入醋酸酐，充分混合。注意操作时避免浓HCl 溅出，最好在通风条件下进行。
生物体内有些组织，如神经组织中的蛋白质，对带负电荷的核酸探针较易吸附。经该液乙酰化处理后，可使切片标本表现带上负电荷，有排斥带负电的核酸探针，减少非特异吸附，降低反应背景的作用。
