五、PCR-SSCP分析技术
近几年来，在PCR基础上完善和发展起来的多种基因变异检测方法是基因分析和检测的一次技术革命。其中日本学者创建的PCR-SSCP（Single-Strand Conformation Polymorphism anal－ysis of PCR products)格外重要。它是指单链DNA分子在变性PAGE中电泳迁移率随其构象的改变而改变的性质。单链DNA分子的构象改变即可由DNA多态性引起，又可由基因突变引起。为此，有的学者试图用PCR-SSGE（Single-Strand Gel Electrophoresis of PCR products)代替原命名。
PCR-SSCP分析包括PCR扩增和单链产物电泳两个阶段。对于分析小于400bp的PCR产物十分有效，对于大于400bp的PCR产物需处理后再分析，必须注意的是PCR-SSCP分析不能确定基因变异部位和内容，泳动后必须进一步完成DNA测序。
六、结语
PCR技术以惊人的速度在研究与诊断领域得到应用，限于篇幅所限，在此不一一进行讨论了。本章 重点讨论了PCR技术发展的有关内容，尤为影响PCR的主要因素和PCR的各种反应模式及新进展，以求大家在实际工作中能够注意到这些问题，并有所创新，相信由于PCR自身高敏感性及实用性，在分子生物学研究与医学实践中PCR技术将越来越受到人们的重视。无论从哪一个角度，PCR技术从分子水平对许多传染病、遗传性疾病和肿瘤进行诊断，使法医鉴定、生物进化的研究更为简便和强化，在遗传学、分子生物学、生物工程与医学研究中都占有重要的地位。
PCR技术是以生物体内DNA复制为基础理论的，这一技术把基础理论与应用有机结合起来，给我们以辩证的思考。对于其它学科中有关理论与实践结合的问题具有指导意义。PCR技术必将为我们提供大量有关核酸的知识，丰富我们的理论，改变我们以前的认识，推动学科的向前发展。
参考文献
1．L．Z．Xu and D Larzul. The polymerase reaction：Basic Methodology and Applications. Comp.Immun. Microbiol. Infet Dis, 1991, 14(3)：209～221
2.Mullis K, Faloona F, Scharf S, Horn G, et al. Specific enzymatic amplification of DNA in vitro ：the polymerase chain reaction：Cold Spring Habor Symp. Quant. Biol., 1986,51：263～273
3.Saiki R K, Scharf S, Faloona F, et al. Enzymatic aniplification of β-globin genomic sequences and restriction site anylysis for diagnosis of sickle cell anemia.Sciencer, 1985；230：1350～1354
4.Chien A, Edgar D B, Tela J M. Deoxyribonucleic acid polymerase from the extreme thermophile thermus aquaticus. J. Bacterial, 1976；127：1550
5.Saiki RK, Gefland D H, Stoffel S, et al. Primer –directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase. Science, 1988；239：487～489
6.黄培堂,等.PCR技术的原理与应用.科学出版社.1992
7.朱平,等.PCR聚合酶链反应操作实验指南.科学出版社,1992
8.马立人,等.PCR技术的发展和文献,内部资料.
9.金冬雁,等译.分子克隆操作指南.科学出版社,1992
10.Wang H C.PCRDESN and PCRDESNA for PCR primer design.Compt. Biol. Med, (insoftware survery section),1991；21(1/2)：1
11.Todd Lowe, John Sharefkin, Shi Qiyang, et al. Dieffenbach,A computer program for selection of oligonucleotide primers for polymerase chain Reaction, Nucleic Acids Res, 1990；18：1757～1761
12. Erlich, Eds. New York：PCR Technology. Stockon Press, 1989：17～22
13.Saiki RK, et al. Amplifications, 1989；1：4～6
14.Stoffel. Amplifications , 1991；6：14
15. Eric PH, Yap, James O’ D DcGee. Slide PCR：DNa amplification from cell samples on microscpic glass slides, Nucleic Acids Res.,1991；19(15)：4294
16. 马立人.基因诊断的发展和应用,内部资料,1993
17. Takeshi Sano , Cassandral Smith, Charles R, et al. Immuno –PCR：Very sensitive antigen detection by means of specific antibody –DNA conjugates. Science, 1992；258：120～122
18. D Y Kwoh, G R Davis, K M Whitefield , et al.Transcription – hased, amplification system and detection of amplified human immunodefi－ciency virus type1 with a bead based sandwich hybridization format.Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1989；86：1137～1177
19.Birkenmeyer L G. Isak Mushahwar. DNA probe amplification methods. J Virol. Methods, 1991；35：117～126
20. Barany Francis. Genetic desiease dectection and DNA amplification using cloned thermostable ligase. Proc. Natl. Acad, Sci, USA,1991；88：189～193
