(六)抗体形成法
IL-6可在体外刺激某些B淋巴细胞系产生和分泌免疫球蛋白,常用的指示细胞有分泌IgG的ARH-77、CESS和分泌IgM的SKW6.CL-4。在一定的条件下,待检样品中IL-6水平与培养细胞上清IgG或IgM水平正相关,通过标准IL-6的对照可推算出待检样品中IL-6的活性。
表4-22 细胞因子生物学活性检测方法(举例)
被检细胞因子 |
实验系统 |
可干扰的因素 | |
IL-1 | D.10(小鼠T细胞) | 增殖法(3H-TdR、MTT) | 人IL-2;小鼠IL-2、IL-4、IL-7、GM-CSF、TNF等 |
小鼠胸腺细胞 | 增殖法 | TGF-β1、β2抑制作用 | |
IL-4(小鼠胸腺瘤) | CTLL转换法(增殖法) | 小鼠IL-4 | |
黑素瘤细胞A352 | 增殖抑制法 | ||
IL-2 | CTLL(小鼠杀伤性T细胞系) | 增殖法 | 小鼠IL-4 |
IL-3 | KG1(髓样白血病细胞) | 增殖法 | |
TF-1(前髓样细胞) | 增殖法 | EPO、IL-5、IL-6、GM-CSF | |
小鼠造血细胞系FDCP-1 | 增殖法 | GM-CSF | |
人巨核母细胞白血病细胞系Mo7E | 增殖法 | GM-CSF、IL-9 | |
骨髓半固体造血祖细胞集落形成 | 20α类固醇脱氢酶 | GM-CSF | |
集落种类和数量 | GM-CSF、IL-1、IL-6、G-CSF、M-CSF | ||
IL-4 | 小鼠B细胞 | 诱导CD23、MHCⅡ类 | IFN-γ有抑制作用 |
抗原表达 | |||
PHA刺激的小鼠T细胞 | 增殖法 | IL-2 | |
IL-4依赖细胞株 | 增殖法 | IL-2 | |
人IL-4R转染CTLL | 增殖法 | IL-2 | |
IL-5 | 抗Ig(或SAC)刺激B细胞诱导人或小鼠骨髓半固体培养中嗜酸性粒细胞成熟 | 增殖法 | IL-3 |
抗Ig处理的小鼠B细胞 | IgM分泌 | ||
BCL-1(B淋巴瘤细胞) | 增殖法 | IL-4 | |
IL-6 | TF-1(前髓样细胞) | 增殖法 | EPO、IL-3、IL-5、GM-CSF |
B9(小鼠杂交瘤细胞) | 增殖法 | 小鼠IL-4、IL-11 | |
7TD1(小鼠杂交瘤细胞) | 增殖法 | IL-11 | |
BM60 | 增殖法 | ||
HepG2(肝细胞) | Fibronogen产生 | LIF | |
CESS(EBV转化人B细胞) | IgGβ1、TGF-β2有抑制作用 | ||
DKW6.CL-4 | IgM产生 | TGFβ1、TGF-β2有抑制作用 | |
IL-7 | 骨髓前B细胞 | 增殖法 | |
IL-8 | 中性粒细胞 | 软琼脂趋化法 | 其它化学趋化物质 |
小室趋化法 | G-CSF、M-CSF | ||
IL-9 | Mo7E(巨核细胞白血病系) | 增殖法 | IL-3、GM-CSF |
IL-11 | 7TD1(小鼠杂交瘤细胞系) | 增殖法 | IL-6 |
B9(小鼠杂交瘤细胞系) | 增殖法 | 小鼠IL-4、IL-6 | |
T1165 | 增殖法 | IL-6 | |
IL-12 | PBMC | IFN-γ产生 | IFNα/β/γ |
PHA活化T淋巴母细胞 | 增殖法 | IL-2、IL-4 | |
PBL | LAK杀伤(与IL-2协同) | IL-2、IL-6 | |
骨髓祖细胞 | GM集落形成 | IL-3;TGF-β有抑制作用 | |
TF-1(前髓样细胞) | 增殖法 | EPO、IL-3、IL-5、IL-6 | |
小鼠造血细胞FDCP-1 | 增殖法 | IL-3 | |
人巨核母细胞白血病细胞系Mo7E | 增殖法 | IL-3、IL-9 | |
AML-193 | 增殖法 | ||
造血祖细胞 | 粒细胞集落形成 | IL-3、IL-9 | |
中性粒细胞 | 活化后超氧释放 | GM-CSF | |
WEHI164亚克隆13或L929 | 杀伤作用 | GM-CSF、IL-6 | |
TNF-α和TNF-β(LT)有相似的杀伤作用 | |||
PDGF | 成纤维细胞和SS、WHG、WI26、WI28 | 增殖法 | FGF(1、2、5)、EGF、TGF-β、IL-1、TNF等 |
INF-α/β/γ | 上皮细胞如Hep-2、Wish | 抵抗病毒(如VSV)的致病变作用 | FN-α/β/γ有相似的生物学活性 |
TGF-β | 成纤维细胞(半固体培养) | 增殖法 | |
成骨细胞单层培养 | 增殖法 | ||
PHA刺激PBMC | 增殖抑制法 | ||
ConA/IL-1诱导胸腺细胞 | 增殖抑制法 | IL-2、IL-4 | |
人黑素瘤细胞A375 | 增殖抵制法 | IL-1、IL-2、IL-4 |