本方法采用高效液相色谱法测定注射用穿琥宁中穿琥宁（C₂₈H₃₆KO₁₀)的含量。

本方法适用于注射用穿琥宁。

供试品制成流动相溶液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长251nm处检测穿琥宁吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇

2. 0.05%磷酸二氢钾溶液（用磷酸调pH值至2.5±0.05)

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯峰计算不低于3000。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：0.05%磷酸二氢钾溶液 甲醇=3：7，

2.2 检测波长：251nm

2.3 柱温：室温

1. 称取供试品

精密称取装量差异项下内容物适量（约相当于穿琥宁100mg)。

2. 对照品溶液的制备

精密称取脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯适量，加流动相溶解并制成每1mL含0.1mg的溶液，摇匀，即得。

3. 供试品溶液的制备

将供试品加流动相溶解后，制成每1mL含0.1mg的溶液，摇匀，即得。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长251nm处测定脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯的吸收值，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.453。