本方法采用高效液相色谱法测定多巴丝肼片中左旋多巴（C₉H₁₁NO₄)和盐酸苄丝肼（C₁₀H₁₅N₃O₅ ·HCl)的含量。

本方法适用于多巴丝肼片。

供试品制成水溶液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长270nm 和220nm处检测左旋多巴和盐酸苄丝肼吸收值，计算出其含量。

1. 0.05mol/L磷酸二氢钾溶液

2. 甲醇

3. 乙腈

4. 0.005mol/L癸烷磺酸钠溶液

5. 磷酸

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按苄丝肼峰计算应不低于1000，左旋多巴峰与盐酸苄丝肼峰的分离度应符合要求。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：0.05mol/L磷酸二氢钾溶液 甲醇 乙腈=70.5 25 4.5，制成0.005mol/L癸烷磺酸钠溶液，并用磷酸调节pH值至3.5。

2.2 检测波长：左旋多巴270nm，待左旋多巴出峰完全后检测波长改为220nm。

2.3 柱温：室温

1. 称取供试品

取本品10片，精密称定，研细，精密称取本品适量（约相当于左旋多巴100mg，苄丝肼28.5mg)，置200mL量瓶中。

2. 对照品溶液的制备

精密称取盐酸丝肼与盐酸三羟苄基苄丝肼对照品适量，分别加流动相溶解并定量稀释制成每1mL中含有0.285mg的溶液。

精密称取左旋多巴对照品100mg与盐酸苄丝肼对照品约28.5mg，置同一200mL量瓶中，加流动相适量振摇使溶解，精密加入上述盐酸丝肼溶液2mL与盐酸三羟苄基苄丝肼溶液3mL，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得混合对照品溶液。

3. 供试品溶液的制备

将供试品流动相180mL超声处理2分钟，振摇15分钟，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，先于波长270nm处测定左旋多巴的吸收值，待左旋多巴出峰完全后检测波长改为220nm苄丝肼的吸收值，按外标峰面积法计算出其含量。