本方法采用高效液相色谱法测定盐酸美他环素（C₂₂H₂₂N₂O₈·HCl)的含量。

本方法适用于盐酸美他环素。

1. 0.05mol/L草酸铵溶液

2. 二甲基甲酰胺

3. 0.2mol/L磷酸二氢铵溶液

4. 磷酸

5. 0.01mol/L盐酸溶液

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，美他环素峰与土霉素峰分离度应符大于4.0。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：0.1mol/L草酸铵溶液 二甲基甲酰胺 0.2mol/L磷酸二氢铵溶液=68 27 5，用磷酸调节pH值至7.6±0.2。

2.2 检测波长：280nm

2.3 柱温：35℃

2.4 流速：1mL/min。

1. 称取供试品

精密称取本品20mg，置25mL量瓶中。

2. 对照品溶液的制备

精密称取20mg，加0.01mol/L盐酸溶液溶解并制成每1mL含0.8mg的溶液，摇匀，即得。

3. 供试品溶液的制备

将供试品加0.01mol/L盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.549。