本方法采用高效液相色谱法测定氨苄西林钠中氨苄西林（C₁₆H₁₉N₃O₄S)的含量。

本方法适用于氨苄西林钠。

供试品制成流动相A溶液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长254nm处检测氨苄西林钠吸收值，计算出其含量。

1. 流动相A：12%醋酸溶液 0.2mol/L磷酸二氢钾溶液 乙腈 水=0.5 50 50 900

2. 流动相B：12%醋酸溶液 0.2mol/L磷酸二氢钾溶液 乙腈 水=0.5 50 400 550

1. 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：流动相A 流动相B =85 15，

2.2 检测波长：254 nm

2.3 柱温：室温

1. 称取供试品

精密称取本品约50mg，置50mL量瓶中。

2. 对照品溶液的制备

精密称取适量，加流动相A溶解并制成每1mL含1mg的溶液，摇匀，即得。

3. 供试品溶液的制备

将供试品加流动相A溶解并定量稀释至刻度，摇匀，即得。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长254nm处测定氨苄西林钠的吸收值，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.613。