本方法采用高效液相色谱法测定雌二醇缓释贴片中雌二醇（C₁₈H₂₄O₂)的含量。

本方法适用于雌二醇缓释贴片中雌二醇的含量测定。

取本品除去铝塑薄膜，乙酸乙酯浸泡，超声处理使雌二醇溶解，加甲醇稀释，滤过，取续滤液适量注入液相色谱仪，在280nm波长处检测，记录色谱图。另取雌二醇对照品甲醇溶解并定量稀释制成每1mL中含约25μg的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，求出每片的平均含量，即得。

1. 甲醇

2. 乙酸乙酯

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按雌二醇峰计算不低于2000。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：甲醇＋水=75 25

2.2 检测波长：280nm

2.3 柱温：室温

1. 对照品溶液的制备

精密称取雌二醇对照品适量，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1mL中含约25μg的溶液，摇匀，即为对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备

本品1片，除去铝塑薄膜，置100mL量瓶中，加乙酸乙酯5mL，浸泡30分钟，超声处理15分钟使雌二醇溶解，放冷至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别取供试品及对照品溶液20μL注入液相色谱仪，在280nm波长处检测，记录色谱图。按外标法以峰面积计算，求出每片的平均含量，即得。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.830。