本方法采用分光光度法测定醋酸泼尼松眼膏中醋酸泼尼松的含量。

本方法适用醋酸泼尼松眼膏。

供试品经乙醇溶解稀释后与氯化三苯四氮唑试液和氢氧化四甲基铵试液反应后，置于分光光度计，于波长485nm处测定吸收度，计算其含量。

1. 无水乙醇

2. 氯化三苯四氮唑试液：取氯化三苯四氮唑试液1g，加无水乙醇使溶解成200mL，即得。

3. 氢氧化四甲基铵试液：取10％氢氧化四甲基铵溶液1mL，加无水乙醇使成10mL，即得。

紫外－可见分光光度计

1. 对照品溶液的制备

醋酸泼尼松对照品约25mg，精密称定，置100mL容量瓶中，加无水乙醇稀释制刻度，摇匀。

2. 供试品溶液的制备

取本品5g (约相当于醋酸泼尼松25mg)，置烧杯中，加无水乙醇约30mL，置水浴上加热，充分搅拌使醋酸泼尼松溶解，再置冰浴中放冷后，滤过，滤液置100mL量瓶中，同法提取3次，滤液并入量瓶中，加无水乙醇稀释制刻度，摇匀。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1.对照品的测定

精密量取对照品溶液1mL，置干燥具塞试管中，各精密加无水乙醇9mL，氯化三苯四氮唑试液2mL，再精密加氢氧化四甲基铵试液2mL，摇匀，置25ºC的暗处40分钟，在485nm波长处测定吸光度。

2.供试品的测定

精密量取供试品溶液1mL，置干燥具塞试管中，各精密加无水乙醇9mL，氯化三苯四氮唑试液2mL，再精密加氢氧化四甲基铵试液2mL，摇匀，置25ºC的暗处40分钟，在485nm波长处测定吸光度。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.846。