本方法采用高效液相色谱法测定醋酸氢化可的松乳膏中醋酸氢化可的松的含量。

本方法适用于醋酸氢化可的松乳膏。

供试品经处理后用甲醇溶解并稀释成一定浓度的溶液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长254nm处检测醋酸氢化可的松的吸收值，计算出其含量。

1. 乙腈（色谱纯)

2. 水（色谱纯)

3. 甲醇

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按醋酸氢化可的松峰计算一般为6000，醋酸氢化可的松与醋酸可的松的 分离度应大于5.5。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：乙腈：水= 38 62

2.2 检测波长：254nm

2.3 柱温：室温

1. 对照品溶液的制备

取醋酸氢化可的松11mg，精密称定，置50mL量瓶中，加甲醇适量，超声使溶解，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取2mL，置25mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。

2. 供试品溶液的制备

取本品适量，（约相当与醋酸氢化可的松5mg)，精密称定，精密加甲醇50mL，用匀浆机以每分钟9500转搅拌（60±10)秒，用双层滤纸过滤，弃去初滤液5mL，精密量取续滤液5mL，置25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长254nm处测定醋酸氢化可的松的吸收值，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，一部，p851。