方法名称: |
六味地黄丸-没食子酸/泽泻醇A乙酸酯/番木鳖苷/莫罗苷/羟基芍药苷/梓醇/苯甲酰羟基芍药苷/泽泻醇B/熊果酸-高效液相色谱/电喷雾电离-质谱分析 |
应用范围: |
本方法采用高效液相色谱法/电喷雾电离-质谱分析对六味地黄丸中没食子酸/泽泻醇A乙酸酯/番木鳖苷/莫罗苷/羟基芍药苷/梓醇/苯甲酰羟基芍药苷/泽泻醇B/熊果酸进行了定性分析。 本方法适用于中成药六味地黄丸。 |
方法原理: |
供试品粉碎,加入95%乙醇超声波提取过滤。用高效液相色谱仪/电喷雾电离-质谱分析,通过二级质谱识别六味地黄丸中的九种化学成分,没食子酸/泽泻醇A乙酸酯/番木鳖苷/莫罗苷/羟基芍药苷/梓醇/苯甲酰羟基芍药苷/泽泻醇B/熊果酸。。 |
试剂: |
1. 乙腈(HPLC级) 2. 95%乙醇(分析纯) 3. 超纯水 |
仪器设备: |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 离子阱质谱联用仪及工作站 1.3 二极管阵列检测器 1.4 色谱柱:Zorbax SB-C18柱(250mm×5.6mm,5μm) 1.5超声发生器 2 色谱条件 2.1流动相:其中溶剂A为乙腈,溶剂B为水,梯度洗脱, 程序为5%A(保持5 min) ®10 min 30%A®15 min50%A®10 min90%(保持20 min),流速1.0ml/min。 2.2二极管阵列检测器设定检测波长:254nm 2.3进样量:自动进样10μL 2.4 质谱条件的:ESI离子源,负离子检出模式;雾化气N2,压力68.948kPa(10psi);干燥气N2,流速10L/min;扫描范围100-1200u。 |
试样制备: |
供试品溶液的制备 取六味地黄丸粉碎,称取粉末3 g,加入95%乙醇约50mL,超声波振荡提取3次,每次15 min,合并提取液,过滤。将滤液减压浓缩,用95%乙醇定容至50 mL,定容后用0 45μm微孔滤膜过滤,滤液作为HPLC-MS分析样品。 |
操作步骤: |
取供试品溶液,自动进样10μL,梯度洗脱,运行时间60分钟,进行高效液相色谱/电喷雾电离-质谱检测,二极管阵列检测器设定波长254nm,对样品进行全扫描,并对质量范围100-1200u的离子进行强度相加,从而获得样品总离子流色谱图,采用负离子检出模式对六味地黄丸中没食子酸/泽泻醇A乙酸酯/番木鳖苷/莫罗苷/羟基芍药苷/梓醇/苯甲酰羟基芍药苷/泽泻醇B/熊果酸进行了定性分析。 |
参考文献: |
赵新峰,孙毓庆,六味地黄丸的高效液相色谱/电喷雾电离-质谱分析,色谱,2003,21(.5):500~502。 |