本方法采用高效液相色谱法测定广防风苷A的含量

本方法适用于广防风(Epimeredi indica(L.) Rothmalex)根单味中药制成的颗粒。

采用高效液相色谱外标法测定广防风颗粒中的广防风苷A含量。

1. 乙腈为色谱纯；

2. 甲醇

3. 广防风苷A对照品（自制)

1 仪器

1.1 液相色谱仪

1.2 紫外检测器

1.3 色谱柱Discovery C₁₈色谱柱(250mm×4.6mm)

1.4. 电子分析天平

2 试验条件

2.1流动相∶乙腈＋水=27＋73

2.2 流速：1.0ml·min^-1，

2.3 检测波长：320nm

2.4 柱温：室温

2.5 系统适应性： 理论塔板数以广防风苷A峰计算应不低于2000；分离度均大于1.5。

1.照品溶液的制备

精密称取广防风苷A对照品(80℃干燥至恒重)5mg，加甲醇超声溶解，定容至25mL，作为对照品溶液。精密吸取对照液各0.4，0.8，1.2mL，1.6，2.0mL，分别用甲醇定容至2mL，摇匀，得浓度分别为39.6，79.2，118.8， 158.4，198μg·mL^-1的广防风苷A标准液。

2.供试品溶液的制备

精密称取广防风颗粒1.17g，加水超声溶解，定容至10mL，取溶液于13000r·min^-1下离心10min，上清液作为供试样品溶液。

1.标准曲线的制备

在上述色谱条件下，各进样20μL。以峰面积(y)为纵坐标，广防风苷A的浓度(x)为横坐标，进行线性回归，计算回归方程Y=20.139X- 154.35；r=0.9994；)，线性范围：0.792～3.960μg。

2.样品测定

取供试品溶液适量，注入液相色谱仪，测定峰面积，外标法计算含量。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。