本方法采用高效液相色谱法测定苦地丁中紫堇灵的含量。

本方法适用于罂粟科植物紫堇Corydalis bungeana Turcz.的干燥全草。

本品加甲醇超声处理，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长289nm处检测紫堇灵的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇

2. 0.015mol/L磷酸盐缓冲液（pH6.7)：取磷酸二氢钾1.58g和磷酸氢二钾0.76g，加水1000mL溶解，混匀，用氢氧化钠试液调节pH值至6.7。

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按紫堇灵峰计算应不低于6000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇 0.015mol/L磷酸盐缓冲液（pH6.7)＝70 30

2.2检测波长：289nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

精密称定本品粉末（过三号筛)0.5g，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取紫堇灵对照品适量，加甲醇制成每1mL含40mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

取本品粉末（过三号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，称定重量，浸泡1小时，超声处理（功率250W，频率33kHz)30分钟，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长289nm处测定紫堇灵（C₂₁H₂₁O₅N)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p139。