方法名称: |
人工牛黄—胆红素的测定—紫外可见分光光度法 |
应用范围: |
本方法采用分光光度法测定人工牛黄中胆红素的含量。 本方法适用于由牛胆粉、胆酸、猪去氧胆酸、牛黄酸、胆红素、胆固醇、微量元素等制成的人工牛黄。 |
方法原理: |
供试品经三氯甲烷超声定量提取,过滤,续滤液置紫外可见分光光度计, 于波长453nm处测定吸收度,计算其胆红素的量。 |
试剂: |
三氯甲烷 |
仪器设备: |
紫外-可见分光光度计 |
试样制备: |
对照品溶液的制备 取胆红素对照品10mg,精密称定,置100mL棕色量瓶中,加三氯甲烷80mL超声处理使充分溶解,加三氯甲烷稀释至刻度,摇匀。精密量取10 mL,置50 mL棕色量瓶中,用三氯甲烷稀释至刻度,摇匀,制成每1mL含胆红素20mg的溶液。 |
操作步骤: |
1. 标准曲线的绘制 精密吸取对照品溶液4mL、5mL、6mL、7mL与8mL,分别置25 mL棕色量瓶中,用三氯甲烷稀释至刻度,摇匀,照分光光度法,分别在453nm波长处测定吸收度,以吸收度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。 2. 供试品的测定 取本品80mg,精密称定,置100 mL棕色量瓶中,加三氯甲烷80mL超声处理使充分溶解,用三氯甲烷稀释至刻度,摇匀,滤过,弃去初滤液,取续滤液在453nm波长处测定吸收度,从标准曲线上读出供试品溶液中胆红素的重量,计算。 |
参考文献: |
中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005年版,一部,p.4。 |