本方法采用高效液相色谱法测定断血流颗粒中醉鱼草皂苷Ⅳb的含量。

本方法适用于中成药断血流颗粒。

本品加甲醇超声处理，滤液蒸干后的残渣加水溶解，用正丁醇振摇提取，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长250nm处检测醉鱼草皂苷Ⅳb的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇

2. 正丁醇

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按醉鱼草皂苷Ⅳb峰计算应不低于3000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇 水＝80 20

2.2检测波长：250nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

取装量差异项下的本品，研细，取约0.5g，精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取醉鱼草皂苷Ⅳb对照品适量，加甲醇制成每1mL含10mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

取装量差异项下的本品，研细，取约0.5g，精密称定，加甲醇30mL，超声处理（功率220W，频率50kHz)15分钟，滤过，滤渣再加甲醇30mL，超声处理15分钟，滤过，合并滤液，蒸干，残渣加水30mL使溶解，移入分液漏斗中，加水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次20mL，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的氨试液30mL洗涤，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次30mL，取正丁醇液蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至50mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长250nm处测定醉鱼草皂苷Ⅳb（C₂₇H₃₄O₁₁)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p608。