方法名称: |
野菊花栓-蒙花苷的测定-高效液相色谱法 |
应用范围: |
本方法采用高效液相色谱法测定野菊花栓中蒙花苷的含量。 本方法适用于中成药野菊花栓。 |
方法原理: |
本品加石油醚超声提取,药渣加甲醇溶解并超声提取,放冷,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长326nm处检测蒙花苷的吸收值,计算出其含量。 |
试剂: |
1. 甲醇 2. 冰醋酸 3. 石油醚 |
仪器设备: |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按蒙花苷峰计算应不低于2500。 1.3 紫外吸收检测器 2色谱条件 2.1流动相:甲醇 水 冰醋酸=54 44 2 2.2检测波长:326nm 2.3柱温:室温 |
试样制备: |
1. 称取供试品 取重量差异项下的本品5粒,置小烧杯中,在60℃水浴中加热使熔化,取出,在不断搅拌下冷却至室温,取约0.8g,精密称定,为供试品。 2. 对照品溶液的制备 精密称取蒙花苷对照品适量,加甲醇制成每1mL含40mg的溶液。 3. 供试品溶液的制备 取重量差异项下的本品5粒,置小烧杯中,在60℃水浴中加热使熔化,取出,在不断搅拌下冷却至室温,取约0.8g,精密称定,置10mL具塞离心管中,加石油醚(60~90℃)5mL,50℃超声处理(功率250W,频率33kHz)15分钟,取出,离心,倾去上清液,药渣再用石油醚(60~90℃)同法处理一次,弃去石油醚液,药渣挥尽溶剂,加甲醇适量使溶解并转移至100mL量瓶中,加甲醇适量,在60℃超声处理30分钟,放冷,加甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长326nm处测定蒙花苷(C28H32O14)的峰面积,计算出其含量。 |
参考文献: |
中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p596。 |