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红芪-异黄酮的含量测定-RP-HPLC
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方法名称:
  红芪-异黄酮的含量测定-RP-HPLC
应用范围:
  用于红芪中两种异黄酮类成分的含量测定
方法原理:
 本品细粉加14%甲醇超声提取,经液相色谱分离,在225nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备 Waters 600E高效液相色谱仪系列:在线脱气机,四元泵,2996二级管阵列检测器,Millen2num32色谱工作站,自动进样器,柱温箱, KromasilODS21柱(5μm,416mm×250mm),Kromasil ODS保护柱(5μm,416 mm×10mm); KQ3200DB 超声波清洗器

色谱条件   Kromasil C18色谱柱(5μm ,4.6mm×250mm) , Kromasil C18保护柱(5μm ,4.6mm×10mm) ,流动相为甲醇-水,梯度洗脱,检测波长254nm,流速110ml/min,柱温25℃。
试样制备:
 

对照品溶液的制备   分别精密称取毛蕊异黄酮和芒柄花素1.88mg、1.86mg,加甲醇超声溶解,定容于2ml 容量瓶中,作为贮备液,分别精密吸取这两种对照品贮备液0.1ml,定容至1ml,再分别稀释成5个系列浓度的对照品溶液,

供试品溶液的制备  用四分法取样,精密称取红芪样品2.500g,以甲醇为溶剂超声提取3次(每次20min),提取液蒸去甲醇,用30 ml蒸馏水溶解,用水饱和的正丁醇(30、30、20、15 ml) 萃取四次,合并正丁醇部分,减压蒸干,残渣用甲醇定容至5ml,用0.45μm微孔滤膜过滤。
操作步骤:
  在选定的色谱条件下,分别吸取对照品和供试品溶液各5μl进样,测定峰面积值,按外标法计算含量
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  胡芳弟,封士兰,赵健雄. RP-HPLC 法测定红芪中两种异黄酮类成分的含量.陕西中医. 2006,27(8):1003~1334
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