方法名称： |
鸡肠-氨基酸的含量测定-HPLC |
应用范围： |
本法可用于鸡肠中氨基酸的含量测定 |
方法原理： |
鸡肠洗净绞碎冷冻研细用丙酮: 氯仿(3∶1 V:V ) 的溶液洗涤，再加入112ml内含1%苯酚的6mol/L HCl 溶液水解, 经液相色谱分离，在254nm处测定峰面积，外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 Waters 高效液相色谱仪(包括810数据库, 510泵, 441紫外吸收检测器) , P ICO·TA G工作台, P ICO·TA G氨基酸分析专用柱(15cm ×319mm , C18, 孔径3Lm) , 微波炉(RE-630D 型 |
试样制备： |
供试品溶液的制备 将鸡肠用水充分洗净, 经绞肉机绞碎, 混匀, 放入冰箱中冷冻。取出用研钵研细, 然后用丙酮:氯仿(3∶1 V:V ) 的溶液多次提取, 过滤，挥干溶剂，称7m g 样品于聚四氟乙烯罐内，加入112ml内含1%苯酚的6mol/L HCl溶液，施紧内外盖，放入微波炉内进行微波水解7m in，水解完毕后用水转移定容至5ml。取25μL此溶液在PICO-TAG工作台上进行抽真空干燥和衍生, 最后用稀释液稀释, 取10ul 进样分析。 |
操作步骤： |
按上述色谱条件，分别取对照品及供试品溶液10μL 进样，用钩藤碱和黄芩苷峰面积计算各指标成分的含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
尚素芬,王洪. 鸡肠中氨基酸含量的高效液相色谱分析. 氨基酸和生物资源.1997.19.(1);22~24 |
