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决明子-大黄素和大黄酚的含量测定-HPLC1
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方法名称:
  决明子-大黄素和大黄酚的含量测定-HPLC1
应用范围:
  用于决明子中大黄素和大黄酚的含量测定
方法原理:
 本品粉末分别加甲醇、氯仿回流提取,经液相色谱分离,在254 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器设  HP1100 高效液相色谱仪(Anglient C0mpany),包括G1322A 真空脱气机,G1311A 双泵,G1314A 紫外检测器,HP化学工作站

色谱条件 

色谱柱:Hypersil ODS4.6 mm×250 mm5 μm)

流动相:甲醇-0.1 %磷酸溶液(85∶15)

流速:1.0 mL/min

检测波长:254 nm

进样量:20 μL
试样制备:
 

对照品溶液制备    精密称取大黄素、大黄酚对照品各5 mg,分别置50 mL量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,分别精密吸取大黄素、大黄酚溶液适量,加甲醇配成每1 mL含大黄素8 μg和大黄酚10 μg的溶液,即得。

供试品溶液制备    取本品粉末(过4号筛)约0.5 g,精密称定,置50 mL锥形瓶中,精密加入甲醇25 mL,称定重量,加热回流30 min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液5 mL,置50 mL圆底烧瓶中,挥去甲醇,加2.5 mol/L硫酸液10 mL,超声处理5 min,再加氯仿10 mL,加热回流1 h,冷却。移置分液漏斗中,用少量氯仿洗涤容器,并入分液漏斗中,分取氯仿层。酸液用氯仿提取2 次,每次约8 mL,合并氯仿液,以无水硫酸钠脱水,氯仿液移至100 mL锥形瓶中,挥去氯仿。残渣精密加甲醇10 mL,称定重量,置水浴中微热溶解,放冷后,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
操作步骤:
  分别精密吸取大黄素和大黄酚对照液以及决明子供试品溶液各20 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算大黄素和大黄酚含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  王京霞,许家鸾. 决明子中大黄素和大黄酚含量的测定. 中国中医药信息杂志. 2005,12(6):49~50
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