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黄芩—黄芩苷和汉黄芩苷含量测定—HPLC-DAD
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方法名称:
  黄芩—黄芩苷和汉黄芩苷含量测定—HPLC-DAD
应用范围:
  用于不同规格并头黄芩的黄芩苷和汉黄芩苷含量测定
方法原理:
 本品用50%中性乙醇渗漉提取,经液相色谱分离,在280nm、330nnm处测定峰面积,以外标法计算含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备  Agilen 1100 型高效液相色谱仪;G13158DAD检测器。

色谱条件  色谱柱:Phenomenex Luna C18分析柱(25 mm×4.6mm,5μm ) ;流动相:A相(含0.05% 醋酸铵、0.01%氨水的水相),B相(含0.05% 醋酸铵、0.01% 氨水的甲醇);检测波长:330 nm (汉黄芩苷)、280nm (黄芩苷) ;体积流量:0.6mL /m in;进样量:20μL;柱温:30℃。梯度洗脱: 0~10 m in (0~20% B),10~30 m in(20% B~40% B),30~45 m in (40% B~60% B),45~50 m in (60% B~100%B)。
试样制备:
 

 对照品溶液的制备: 精密称取黄芩苷和汉黄芩苷对照品各5mg,加色谱甲醇溶解,分别转到50mL的量瓶定容,配成0.1mg/mL的对照品溶液,再稀释法成含黄芩苷和汉黄芩苷均为0.01mg/mL,作为对照品溶液。

供试品溶液的制备: 分别取4种不同规格的并头黄芩粉碎,过40 目筛;分别称取1g,装入微量渗漉装置,加2.5mL50%中性乙醇浸泡1h 后,压实,再用27.5mL 50% 中性乙醇进行渗漉,控制渗漉速度,约1 h 渗漉完,渗漉液稀释60倍,稀释液用0.2微孔滤膜滤过。
操作步骤:
  分别取(1)、(2)、(3)、(4) 4 个不同规格并头黄芩的粉末的渗漉稀释液,过0.2 微孔滤膜的溶液及对照品溶液,进样20μL,并分别由标准线性方程求出黄芩苷和汉黄芩苷含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  温华珍,肖盛元,王义明等. HPLC法测定不同规格并头黄芩的黄芩苷和汉黄芩苷含量. 中草药.2005.36(4):600~602
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