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黄芩细胞—黄芩苷的含量测定—HPLC-UV
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方法名称:
  黄芩细胞—黄芩苷的含量测定—HPLC-UV
应用范围:
  用于悬浮培养黄芩细胞中黄芩苷的含量测定
方法原理:
 本品用甲醇超声提取,离心,取上清液,经液相色谱仪分离,在280nm处测定,外标法计算含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备  Agilent 1100 型高液相色谱仪(美国惠普公司)

色谱条件 色谱柱:Agilent Zorba×80A ExtendC18 (150mm×4. 6mm,3.5μm);流动相:甲醇-0.5%磷酸溶液(50:50) ;柱温:30℃;流速:1ml·min-1 ;检测波长:280nm;进样量:10μl。
试样制备:
 

对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥至恒重的黄芩苷对照品6.10mg,置5ml量瓶中,加甲醇溶解并定容,摇匀,即得1.22 mg·ml-1的黄芩苷对照品溶液。

样品溶液的制备  培养细胞经50℃过夜、干燥至恒重后,取0.50g,加入50ml甲醇,超声提取30min,离心10min (5 ×103 r·min-1 ),收集上清液,再加入50ml甲醇,重复超声提取、离心。合并两次上清液,浓缩至干,加甲醇溶解定容至50ml,作为样品溶液。
操作步骤:
  在上述色谱条件下,分别吸取对照品和供试品溶液各10μl 进样,测定峰面积值,按外标法计算含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  张进杰,徐茂军,俞坚. HPLC测定悬浮培养黄芩细胞中黄芩苷的含量. 华西药学杂志.2006,21 (6) : 575~576
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