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红豆杉—紫杉醇的含量测定—HPLC-UV
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方法名称:
  红豆杉—紫杉醇的含量测定—HPLC-UV
应用范围:
  用于人工栽培南方红豆杉中紫杉醇的含量测定
方法原理:
 本品粉末用二氯甲烷∶甲醇(1∶1)回流提取,浓缩,二氯甲烷萃取后,经液相色谱仪分离,在227nm处测定,按外标法计算含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备 A lltech 426 型高效液相色谱仪;200型紫外检测器;Alltech 外置工作站。

色谱条件  色谱柱:A llt im a C18 5μ柱(5 mm×250 mm );流动相:甲醇-水 (65∶35) ;流量:1.0ml/min;检测波长:227nm;进样量: 20μL;柱温:室温。
试样制备:
 

对照品溶液的制备

供试品溶液的制备 将人工栽培南方红豆杉种子、枝条、叶子和皮于 40 ℃干燥后碾成粉末(过孔径为 0. 32 mm 的筛),分别精确称取2.5g 于200 mL三角瓶中,用100mL甲醇-二氯甲烷(1∶1)混合溶剂浸泡24h,次日超声震荡提取30min,过滤,残渣用甲醇冲洗3次,合并滤液,30℃下减压浓缩,提取物用水(50mL×3)和正己烷(50mL×3)萃取,水层用二氯甲烷萃取3次,合并二氯甲烷萃取液,然后用活性炭(5 g)脱色,过滤,滤液于25℃ 下减压干燥,用甲醇 1mL溶解,0. 45μm 微孔滤膜过滤,分别配制好种子、枝条、叶和皮的样品制备液。
操作步骤:
  精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μL,注入液相色谱仪,依上述色谱条件测定,按外标法计算含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  李俊,牙启康,苏小建等.人工栽培南方红豆杉紫杉醇的含量分析.广西师范大学学报(自然科学版) .2005,23(2):68~69
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