西藏红豆杉叶—紫杉醇的含量测定—HPLC-DAD-中药质量控制方法 -

方法名称：

西藏红豆杉叶—紫杉醇的含量测定—HPLC-DAD

应用范围：

用于西藏红豆杉叶中紫杉醇的含量测定

方法原理：

本品用甲醇超声提取，过氧化铝柱，经液相色谱仪分离，在227nm处测定，按外标法计算含量。

仪器设备及实验条件：

仪器设备 Agilent1100高效液相色谱仪；DAD检测器；Agilent1100色谱工作站。

色谱条件色谱柱：Kromasil-C18 (250mm×4.6mm，5 μm)柱；流动相：甲醇-水 (65∶35) ；流量：0.8ml/min；检测波长：227nm；柱温：35 ℃。

试样制备：

对照品溶液的制备准确称取对照品紫杉醇1.0mg，置于1.0mL容量瓶中，以甲醇溶解并定容，配制成相应浓度的对照品储备液，使用时用甲醇稀释成浓度0.01mg/ml，作为对照品溶液。。

供试品溶液的制备准确称取粉碎至80目的样品5g，，加入甲醇20mL，超声提取1h，抽滤，以甲醇洗涤滤渣2次，每次1mL.滤渣重复上述操作，所得滤液与前一次滤液合并，回收大部分溶剂后，与2g中性氧化铝吸附混合，干燥1小时装入预先装填好的中性氧化铝(10g)小柱上，用氯仿100%淋洗至流出液无色，然后用三氯甲烷-甲醇(100：5)洗脱至绿色带至柱底层止，温水浴挥干，残渣用甲醇溶解并定容至2mL，即得供试品溶液。

操作步骤：

精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，依上述色谱条件测定，按外标法计算含量。

附件：

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备注：

参考文献：

吴江，卢永昌，朱小军.固相萃取-反相高效液相色谱法测定西藏红豆杉叶中紫杉醇的含量.青海师范大学学报(自然科学版).2006，（3)：71～73

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