红豆杉幼苗—紫杉醇的含量测定—HPLC-DAD-中药质量控制方法 -

方法名称：

红豆杉幼苗—紫杉醇的含量测定—HPLC-DAD

应用范围：

用于人工栽培南方红豆杉幼苗中紫杉醇的含量测定

方法原理：

本品粉末用超声提取、离心、过柱等一系列处理后，经液相色谱仪分离，在230nm处测定，按外标法计算含量。

仪器设备及实验条件：

仪器设备美国Waters Allaince 2695型高效液相色谱仪；Waters 2996型二极管阵列检测器。

色谱条件色谱柱：Waters Symmetry C18 ( 150mm×3.90mm)；C18小柱；流动相：甲醇-乙腈-水 (22：36∶42) ；流量：1.0ml/min；检测波长：230nm；进样量：10μL。

试样制备：

对照品溶液的制备　精密称取紫杉醇对照品适量，以乙腈溶解并稀释成10.2mg/ml的溶液备用。

供试品溶液的制备　精密称取本品粉末3g于100ml锥形瓶中，加95%乙醇25ml浸泡24h，超声处理2h，离心（3000rad/s，3min)过滤，残渣续以95%乙醇15ml浸泡超声2次，每次30min，离心，取上清液，合并滤液于100ml烧杯之哦那个30℃以下风干，残渣用50%甲醇5ml溶解，离心，取上清液过0.45μm滤膜，滤液过C18小柱，用10ml水洗脱，弃去洗脱液，再用6ml50%甲醇溶液洗脱，弃去洗脱液，最后用2ml80%甲醇溶液洗脱，收集洗脱液，为备用液。

操作步骤：

精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，依上述色谱条件测定，按外标法计算含量。

附件：

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备注：

参考文献：

郑广乐，葛彬彬，黄天伟等.HPLC法分析红豆杉中紫杉醇的含量.福建分析测试.2004，13（3-4)：2011～2013

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