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苦参—三叶豆紫檀苷—HPLC
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方法名称:
  苦参—三叶豆紫檀苷—HPLC
应用范围:
  本方法适用于苦参中三叶豆紫檀苷含量的测定
方法原理:
 本品加乙醇回流提取,经液相色谱分离,在310 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器    HITACHI高效液相色谱仪;L7420型检测仪;L7ll0型泵;N2000色谱工作站

试剂    三叶豆紫檀苷(苦参70 %乙醇提取,乙酸乙酯萃取,反复柱层析,经UVIRMSNMR鉴定与文献值一致,HPLC检测为单峰,归一化法测定纯度达98 %以上)

苦参药材由西安植物园王答其副研究员收集和鉴定

色谱条件    色谱柱:SUPELCO C18(25 cm ×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇一水(1:1);流速:1.0 mL/min;柱温:常温;检测波长:310 nm
试样制备:
 

对照品溶液的制备    精密称取真空干燥后的三叶豆紫檀苷5.12 mg,置25 mL量瓶中,加流动相溶解并定容至刻度,摇匀,即得0.2048 mg/mL的对照品溶液。

供试品溶液的制备    精密称取苦参粗粉(过60目筛)0.5 g,置50 mL烧瓶中,准确加人70 %乙醇10 mL,称重,回流处理1 h,放冷,再称重,用70 %乙醇补足减失的质量,摇匀,3000 r/min离心10 min,取上清液作为供试品溶液。
操作步骤:
  分别精密吸取三叶豆紫檀苷对照液以及苦参供试品溶液适量,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算三叶豆紫檀苷含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  赵慧娟,王答其,孙文基.HPLC法测定苦参中三叶豆紫檀苷的含量.药物分析杂志.2005,25(2):175~177
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