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苦参生物碱部位—氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱和槐果碱—HPLC
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方法名称:
  苦参生物碱部位—氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱和槐果碱—HPLC
应用范围:
  本方法适用于苦参生物碱部分中氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱和槐果碱含量的测定
方法原理:
 本品生物碱部位加70 %乙醇超声溶解,经液相色谱分离,在220 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器    Waters515高效液相色谱仪;2487紫外检测器;Empower软件;25 μL可调进样器

色谱条件    色谱柱:Agilent Zorbax C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:溶剂A为10 mmol/L醋酸氨水溶液(0.1 %氨水,pH=9.2),溶剂B为20 mmol/L醋酸铵的甲醇-乙腈(1∶1)混合溶液,洗脱条件为溶剂A-溶剂B梯度洗脱(90∶10→82∶12→66∶34→60∶40,时间:0 min→8 min→14 min→28 min);流速:0.8 mL/min;检测波长:210 nm;柱温:35 ℃
试样制备:
 

对照品溶液的制备    精密称取氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱和槐果碱对照品2.532.752.581.56 mg,分别置25 mL量瓶中,加甲醇溶解,并稀释至刻度,摇匀,备用。

供试品溶液的制备    苦参药材用稀醇回流提取,提取物加水分散,离心,得水溶液和不溶物,不溶物加酸水超声分散,离心,得酸水液,与上述水溶液合并,调中性后浓缩至一定体积,再继续调pH至8,通过大孔吸附树脂柱树脂柱水洗除杂后,用稀醇洗脱,收集醇洗脱液,回收溶剂至干,残留物减压干燥,得苦参生物碱部位。精密称取苦参生物碱部位约5 mg,置5 mL量瓶中,加70 %乙醇超声溶解,并稀释至刻度,摇匀,备用。
操作步骤:
  分别精密吸取氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱和槐果碱对照液以及苦参生物碱部位供试品溶液各15 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱和槐果碱含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  朱丽君,刘斌,石任兵.HPLC法测定苦参生物碱部位中4种成分含量.北京中医药大学学报. 2007.30(11):780~783
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