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含苦参制剂—苦参及苦参汤有效部位—三叶豆紫檀苷—HPLC
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方法名称:
  含苦参制剂—苦参及苦参汤有效部位—三叶豆紫檀苷—HPLC
应用范围:
  本方法适用于苦参及苦参汤有效部位中三叶豆紫檀苷含量的测定
方法原理:
 本品有效部位加50 %甲醇超声提取,经液相色谱分离,在310 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器    Waters 515高效液相色谱仪,Waters 2487紫外检测器,WatersMillennium32色谱工作站,25 μL可调进样器

色谱条件    色谱柱:Phenomenex LunaC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈-磷酸水溶液{磷酸∶水(2∶530)}(26∶74);流速:1.0 mL/min;检测波长:310 nm;柱温:室温
试样制备:
 

对照品溶液的制备   精密称取干燥至恒重的三叶豆紫檀苷4.04 mg,置100 mL量瓶中,加甲醇溶解后稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。

供试品溶液的制备   按苦参汤处方单味药比例,称取苦参、黄芩、生地黄一定量,混匀,用稀乙醇回流提取。乙醇提取液减压回收溶剂,残留物加水分散,通过大孔吸附树脂柱,树脂柱水洗去杂后,用稀乙醇洗脱。乙醇洗脱液回收溶剂,残留物减压干燥,得苦参汤有效部位。精密称取苦参汤有效部位约20 mg,置25 mL锥形瓶中,精密加入50 %甲醇10 mL,超声溶解。溶解液通过中性氧化铝柱4 g,用50 %甲醇30 mL洗脱,收集洗脱液,减压回收溶剂残留物加甲醇4 mL溶解,用0.45 μm微孔滤膜滤过,作为供试品溶液。
操作步骤:
  分别精密吸取对照液以及供试品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  刘斌,石任兵,朱丽君等.HPLC法测定苦参及苦参汤有效部位中三叶豆紫檀苷的含量.北京中医药大学学报. 2006.29(6):412~414,418
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