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积雪草—积雪草苷的含量测定—HPLC-ELSD
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方法名称:
  积雪草—积雪草苷的含量测定—HPLC-ELSD
应用范围:
  用于积雪草中积雪草苷含量的测定
方法原理:
 本品粉末经超声、萃取等一系列处理,用液相色谱仪分离,蒸发光散射检测器检测,外标法计算含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备  Series 1500型高效液相色谱泵(美国LabAlli2ance)ELSD MODEL – 200检测器(美国LabAlli2ance)浙江大学 N2000色谱数据工作站。

色谱条件  色谱柱: Aichrom Reliasil C18柱( 250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇- 水( 55∶45 );流速:1.0mL /min;柱温:35℃;ELSD检测器参数: 蒸发室温度:60℃,气室温度:80℃,氮气压力:45Pa。
试样制备:
 

对照品溶液制备  精密称取积雪草苷对照品15.20 mg25mL量瓶中,加甲醇溶解稀释至刻度,摇匀,作为积雪草苷对照品溶液(0.608mg/mL)

供试品溶液的制备  取本品药材粉碎,过40目筛,干燥至恒重,取约1.0g,精密称定,精密加入甲醇50mL,称定重量,超声( 200W、40Hz) 处理120min,取出,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,滤过,精密量取25mL,挥干甲醇,残渣加0.05mol/L氢氧化钠溶液40mL溶解,用醋酸乙酯续滤液振摇提取两次,每次30mL,弃去醋酸乙酯液,氢氧化钠溶液再以水饱和的正丁醇萃取3 次,每次30mL,合并正丁醇萃取液,用正丁醇饱和的水液洗涤2次,每次20 mL,弃去水液,正丁醇层蒸干,用甲醇溶解并稀释至5mL容量瓶中,作为供试品溶液。
操作步骤:
  精密吸取对照液以及供试品溶液10μl,分别注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积,以外标法计算积雪草苷的含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  向前,杜书良,唐强等.HPLC-ELSD测定积雪草中积雪草苷含量. 成都中医药大学学报2007 30(1):54~55,57
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