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积雪草总苷元—羟基积雪草酸的含量测定—HPLC-DAD
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方法名称:
  积雪草总苷元—羟基积雪草酸的含量测定—HPLC-DAD
应用范围:
  用于50%积雪草总苷元中羟基积雪草酸含量的测定
方法原理:
 本品用甲醇溶解,经液相色谱仪分离,在204nm测定峰面积,按标准曲线法计算含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备  美国Waters公司生产的高效液相色谱系统,配Waters 515型泵、996型二极管阵列检测器;Agilent1100型液质联用仪 (LC-MSD )

色谱条件  色谱柱: Agilent Zorbax SB-C18柱( 150mm×4.6 mm,5 μm ) ;保护柱: Shimadzu Shim –packODS;流动相:甲醇-水(体积比为65∶35,含4mmol /L β-CD ,以乙酸调节pH值为4);流速0.4mL /min;检测波长:204nm;柱温:25℃;进样量:10μL。
试样制备:
 

对照品溶液制备  精密称取羟基积雪草酸对照品 10.0 m g,用甲醇配制成10.0 g /L的溶液,然后用甲醇进行倍比稀释,配成质量浓度依次为 5.02.01.0 0.5 0.1g /L的羟基积雪草酸对照品甲醇溶液,以峰面积( y )对质量浓度 ( xg /L )进行线性回归,羟基积雪草酸的回归方程为 y = 116.54x 10.058 r2=019989。结果表明。样品量在 0.15.0 g /L范围内浓度与峰面积呈线性关系。

供试品溶液的制备  精密称取50%积雪草总苷元适量,置于10 mL容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,配制成50%积雪草总苷元甲醇溶液5.58 g /L 备用,。进样前用0.45μm 微孔滤膜过滤。
操作步骤:
  精密吸取供试品溶液10μl,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积,以标准曲线法法计算羟基积雪草酸含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
  采用在甲醇-水流动相中添加β-环糊精的方法分离了羟基积雪草酸和其同分异构体termi-nolic acid,并测定了50%积雪草总苷元中羟基积雪草酸的含量。
参考文献:
  潘见,开桂青,袁传勋.β-环糊精流动相添加剂法分离测定积雪草总苷元中的羟基积雪草酸. 色谱.2007,25(3):316~318
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