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附子—乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量测定—HPLC-UV-4
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方法名称:
  附子乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量测定—HPLC-UV-4
应用范围:
  用于附子中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量测定
方法原理:
 本品先用水提取,浓缩后,加浓氨水,再用乙醚提取,加入内标液,经液相色谱仪分离,在230nm处测定,按内标法计算含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备    LC-10ATvp 高效液相色谱仪,包括SPD-10Avp 紫外检测器、SIL-10Avp自动进样器、CTO-10Asvp 柱温箱、CLASS-vp 色谱工作站.

色谱条件   色谱柱: Hypersil C8 (250mm×4.6mm,5μm) ;流动相: 甲醇-0.04mol / L三乙胺(50∶50,磷酸调节p H值至6);流速:1.0ml / min ;检测波长:230nm;柱温:40℃。
试样制备:
 

对照品溶液的制备  分准确称取乌头碱2.0mg 、新乌头碱4.1mg 、次乌头碱4.8mg,置于10ml 容量瓶中,加10 %甲醇溶液(盐酸调节p H值至2) 溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。

内标溶液的制备   准确称取阿普唑仑10.2mg , 置于50ml容量瓶中, 加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。

供试品溶液的制备   称取附子饮片50g,加水400ml,浸泡1h,回流提取1h,棉花过滤,滤渣加水400ml 再回流提取1h,过滤,合并滤液,于50℃下以旋转蒸发仪浓缩,加浓氨水调节p H 值至10,再用乙醚20ml 提取3 次,收集乙醚层,氮气吹干,残渣加内标溶液300μl,用10%甲醇溶液(盐酸调节p H值至2) 溶解并定容至5ml,振荡使之溶解,0.4μm 微孔滤膜过滤,取续滤液10μl,供高效液相色谱法分析。
操作步骤:
  在选定的色谱条件下,分别吸取混合对照品溶液和供试品溶液10μL,注入液相色谱仪,记录色谱图,测定峰面积,按内标法计算各组分的含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  刘玉兰,刘世坤,裴奇等. 高效液相色谱法测定附子中3 组分的含量. 中国药房.2006,16(17):1255~1256
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