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附子—次乌头碱的含量测定—HPLC-UV
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方法名称:
  附子—次乌头碱的含量测定—HPLC-UV
应用范围:
  用于附子中次乌头碱的含量测定
方法原理:
 本品细粉用乙醚-氯仿一氨试液提取后,再用硫酸溶液提取,经液相色谱仪分离,在235nm处测定,按外标法计算含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备  HP-1050高效液相色谱仪。

色谱条件  色谱柱:Hypersil ODS (4.60mm×25 mm,5μm);流动相:0.2%冰醋酸(用三乙胺调pH6.25)-乙腈(63∶37);流速:1.0mL/ min;检测波长:235nm;柱温:室温。
试样制备:
 

对照品溶液的制备  精密称取次乌头碱适量。用甲醇溶解并分别配制成0. 0377mg/ml的对照品溶液。

供试品溶液的制备  精密称取本细粉约5g的量,置具塞锥形瓶中,加入乙醚-氯仿(3∶1)的混合溶液50ml和氨试液4ml,摇匀,放置过夜,滤过,药渣加混合溶液50ml,连续振摇1h,滤过,药渣再用上述混合溶液洗涤3~4次,15ml/次,滤过,合并滤液与洗液,蒸干。残渣加混合溶液5ml使溶解,转移至分液漏斗中,用0.05mol/ml的硫酸溶液提取4次,10ml/次,合并硫酸液,加浓氨试液调pH值9~10,摇匀,用氯仿提取4次,10ml/次合并氯液,蒸干,残渣加甲醇溶解并定容至5ml。
操作步骤:
  分别精密量取对照品溶液和供试品溶液各20μL,注入液相色谱仪,在上述色谱条件下,测定峰面积,按外标法计算含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  叶振强,张辉珍.高效液相色谱法测定附子中次乌头碱的含量.时珍国医国药.2006,17 (2) :197~198
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