附子—乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量测定

方法名称：	附子—乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量测定—HPLC-UV-1
应用范围：	用于附子中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量测定
方法原理：	本品粉末用10%氨水浸润，用乙醚超声提取，经液相色谱仪分离，在230nm处测定，按外标法计算含量。
仪器设备及实验条件：	仪器设备 Agilent1100 高效液相色谱仪(在线脱气机、四元泵、自动进样器、柱温箱、VWD 检测器) 色谱条件 Zorbax Eclipse XDB C18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：A （40mmol乙酸铵缓冲液)-B（乙腈)，梯度洗脱:0～15min，33 %B，15～45 min，33%～50%B；流速：1.0mL·min^-1，检测波长：230nm。
试样制备：	对照品溶液的制备　精密称取新乌头碱、乌头碱和次乌头碱对照品适量，加0.01%盐酸-甲醇制成每1mL含新乌头碱223μg、乌头碱79μg和次乌头碱209μg的混合溶液，作为对照品溶液。供试品溶液的制备　取生附片粉末(过40目筛) 1g，精密称定，置锥形瓶中，加10%氨水1mL浸润，再精密加入乙醚25mL，超声提取30min，吸取上清液，残渣用乙醚洗涤3次，每次5mL，合并提取与洗涤的乙醚液，50℃水浴挥干乙醚，用0.01%盐酸-甲醇10mL溶解，过0.45μm滤膜，取续滤液作为生品供试液。取附子各种炮制品粉末(过40目筛) 2g，精密称定，置锥形瓶中，加10%氨水2mL浸润，再精密加入乙醚50mL，超声提取30min，吸取上清液，残渣用乙醚洗涤3次，每次10mL，合并提取与洗涤的乙醚液，50℃水浴挥干乙醚，用0.01 %盐酸-甲醇2mL溶解，过0.45μm 滤膜，取续滤液作为炮制品供试液。
操作步骤：	分别精密量取对照品溶液和各供试品溶液20μL，注入液相色谱仪，在上述色谱条件下，测定峰面积，按外标法计算含量。
附件：	点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注：
参考文献：	刘芳，于向红，李飞等. HPLC测定附子及其炮制品中3种双酯型生物碱的含量．中国中药杂志．2006，14（31)：1160～1162

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