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木瓜-咖啡酸、绿原酸的含量测定-HPLC
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方法名称:
  木瓜-咖啡酸、绿原酸的含量测定-HPLC
应用范围:
  用于木瓜中咖啡酸、绿原酸的含量测定
方法原理:
 本品细粉加甲醇超声提取,经液相色谱分离,在283 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器    DIONEXP680HPLC PUMPSOLVENTRACK SOR-100)

    色谱条件    色谱柱:Kromasil  C18(10 nm~5 μm,4.6 mm×250 mm);流动相: (A)乙腈-甲醇(6∶4) (B)0. 05 %磷酸梯度洗脱,0~12 min(10 %~30 %A,90 % ~70 %B),12~30 min(30 %~50 %A,70 %~50 %B),30~35 min (50 %~70 %A,50 %~30 %B),35~45 min (70 %~90 %A,30 %B~10 %B),45~50 min (90 %~60 %A,10 %~40 %B),50~60 min(60 %~10 %A,40 %~90 %B),60~70 min (10 %A,90 %B);流速:0. 8 mL/min;检测波长:283 nm
试样制备:
 

对照品溶液制备    分别精密称取咖啡酸、绿原酸对照品适量,分别加甲醇制成每毫升含0. 106 mg咖啡酸、0. 492 mg绿原酸对照品溶液;然后分别精密吸取咖啡酸对照品溶液5 mL、绿原酸对照品溶液1 mL,加甲醇定容至25 mL,制成两种对照品的混合溶液。

供试品溶液制备    精密取药材粉末0. 25 g于100 mL具塞锥形瓶中,精密吸取50 mL甲醇,称重,盖好瓶塞后超声提取45 min,称量,并用甲醇补足重量,放冷至室温,滤过,取续滤液,然后用0.45 μm微孔滤膜过滤,即得。
操作步骤:
  分别精密吸取咖啡酸、绿原酸对照液以及木瓜供试品溶液适量,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算咖啡酸、绿原酸含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  黄志军,陶君彦,熊富良等. 木瓜水溶性部位高效液相色谱法指纹图谱研究. 时珍国医国药. 2006,17(10):1869~1871
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