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山东产黄芩—黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量测定—HPLC-DAD
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方法名称:
  山东产黄芩—黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量测定—HPLC-DAD
应用范围:
  用于山东产黄芩中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量测定
方法原理:
 本品粉末用70%乙醇回流提取,经液相色谱仪分离,在276nm处测定,以外标法计算含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备  Agilent 1100高效液相色谱仪;Agilent DAD检测器;Agilent Chemstation工作站(美国安捷伦科技公司)

色谱条件  色谱柱:Phenomenex Prodigy ODS3-C18色谱柱(4.60mm×250mm5μm);流动相: H2O-MeOH-H3PO4溶剂系统梯度洗脱,梯度洗脱时间程序见;流速:1.0ml/ min;柱温:35℃,检测波长:276 nm;进样体积:5μl

1梯度洗脱时间程序

时间( t/ min)

流动相

MeOH

H2O

H3 PO4

0

30

60

10

10

40

50

10

20

50

40

10

30

50

40

10

40

60

30

10

60

80

10

10

试样制备:
 

对照品溶液的制备  分别精密称取黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素对照品适量,用甲醇配制成浓度分别为0.0610mg/ml 0.0300mg/ ml 0.0114mg/ml的混合对照品溶液。

供试品溶液的制备  取黄芩中粉0.2g,精密称定,加入70%乙醇25ml,称量,加热回流3.0h,放冷,用70%乙醇补足重量,取上清液用0.45μm 滤膜滤过,取续滤液作为供试品溶液
操作步骤:
  分别吸取对照品溶液和供试品溶液5μ1,注入液相色谱仪,在上述色谱条件下,测定峰面积,以外标法计算黄芩苷含量
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  靳维荣,石俊英,孙强. HPLC 梯度洗脱法测定山东产黄芩中三种有效成分含量.山东中医药大学学报.2007.31(2):152~155
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