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金银花提取物-绿原酸类成分-HPLC
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方法名称:
  银花提取物-绿原酸类成分-HPLC
应用范围:
  本方法适用于金银花提取物中绿原酸、3,5-二咖啡酰基奎宁酸的含量测定
方法原理:
 本品加水煎煮提取,经液相色谱分离,在327 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器    Agilent-1100高效液相色谱仪,四元泵,自动进样器,柱温箱,DAD二极管阵列检测器,AgilentAl0. 02工作站

   色谱条件    色谱柱:Kromasil C18(4. 6 mm ×250 mm,5 μm);流动相:A为乙腈,B 为0. 3 磷酸溶液,A:0→20 min 5 →10,20→45 min 10 →26;流速:1 mL/min;检测波长:327 nm;柱温:30 ℃
试样制备:
 

对照品溶液制备    分别精密称取绿原酸和35-二咖啡酰基奎宁酸适量,加50 甲醇制成每1 mL含绿原酸0. 408 mg35-二咖啡酰奎宁酸0. 278 mg的混合溶液。精密吸取6 mL10 mL量瓶中,加50 甲醇至刻度,摇匀,即得。

    供试品溶液制备    取金银花药材200 g,3份,分别照文献所收载的石-硫法和改良石-硫法进行提取(两次煎煮用水量均分别为20倍和12倍) 、处理,得浓缩液,继续减压浓缩得稠膏,真空干燥,粉碎成细粉,分别得3种金银花提取物A、B、C。取提取物A、B细粉各75 mg、提取物C细粉25 mg,精密称定,分别置10 mL量瓶中,加50 甲醇至刻度,振摇使完全溶解(B有少量不溶物),0. 45 μm微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。
操作步骤:
  分别精密吸取绿原酸和3,5-二咖啡酰基奎宁酸混合对照液以及金银花供试品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算绿原酸和3,5-二咖啡酰基奎宁酸含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  陈有根等. 3种经典工艺生产的金银花提取物中绿原酸类成分含量比较. 中成药.2007,29(3):362~364
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