仪器设备  大连依利特分析仪器有限公司P200 Ⅱ泵、UV200 型紫外检测器、Echrom 98 色谱数据处理工作站。

标准曲线的制备  分别准确称取精氨酸、脯氨酸和谷氨酸对照品约10 mg，置于10mL量瓶中，用40%乙醇水溶液溶解并稀释至刻度， 摇匀，即得精氨酸、脯氨酸和谷氨酸对照品溶液。准确称取精氨酸、脯氨酸和谷氨酸对照品31.35，33.02 和32.67mg，置于25mL量瓶中，用40%乙醇水溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品混合溶液。准确吸取对照品混合溶液0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，3.5，4.0mL，置于10 mL量瓶中，加衍生缓冲液1.0 mL，摇匀，再加衍生溶液1.0 mL，摇匀，避光，于60℃水浴保温1h，放冷，加平衡溶液至刻度，放置15min后分别进样10μL，测得峰面积，以峰面积对进样量做线性回归，即得。

   衍生缓冲溶液的制备  称取NaHCO₃ 4.2g，加水溶解并定容至100mL，得0.5mol/L NaHCO₃溶液（pH9)。

   平衡溶解的制备  称取KH₂PO₄ 3.4g置于500mL量瓶中，加水溶解，加入0.1 mol/LnaOH 145.5mL，用水定容。