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板蓝根药材--尿苷、腺苷和鸟苷含量测定--HPLC法
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方法名称:
  板蓝根药材--尿苷、腺苷和鸟苷含量测定--HPLC法
应用范围:
  测定板蓝根药材中尿苷、腺苷和鸟苷含量
方法原理:
 药材加水煎煮,煎煮液加95%乙醇静置,经液相色谱仪分离,在254nm 处测定峰面积,外标法计算尿苷、腺苷和鸟苷含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备  Agilent1100系列高效液相色谱仪(在线脱气机,自动进样器,二极管阵检测器,柱温箱)

色谱条件  色谱柱:ZORBAX SB-C18 分析柱(4.6mm ×250mm,5μm);流动相:10mmol/l磷酸二氢钠(1%磷酸调PH2.9)-甲醇(3:97);流速:0.8mL/min;检测波长:254nm;柱温:25℃;进样量:5 μL。
试样制备:
 

对照品溶液的制备: 分别取对照品尿苷,腺苷和鸟苷各约10mg,精密称定,置同一10mL量瓶中,以甲醇-(50:50)超声溶解,定容,摇匀,即得对照品储备液。精密吸取对照品储备液0.5mL,分别置10 mL量瓶中,加甲醇-水(50:50)定容,摇匀,即得。

供试品溶液的制备  取药材粉末(过16目筛)约10g,精密称定,加水300mL煎煮2次,时间分别为2h,1h,滤过,合并滤液,浓缩至10mL,加95%乙醇使醇浓度达65%,静置24h,滤过,回收乙醇,浓缩液转移至10mL量瓶中,加水定容,摇匀,即为提取液。精密量取提取液1mL置5mL量瓶中,加水定容,摇匀,即得。
操作步骤:
  分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各5μL,注入色谱仪,测定,计算即得。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  肖珊珊,金郁,郭怀忠等.RP-HPLC法测定板蓝根药材中核苷类成分的含量.药物分析杂志.2006,26(1):48-50
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