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含红参制剂—红参及生脉注射液—参二醇和人参三醇的含量测定—HP
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方法名称:
  含红参制剂—红参及生脉注射液—参二醇和人参三醇的含量测定—HPLC-UV
应用范围:
  用于红参及生脉注射液中参二醇和人参三醇的含量测定
方法原理:
 本品经超声提取、离心、酸水解、萃取等步骤,经液相色谱仪分离,在230nm测定,以外标法计算含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备  日本岛津LC26A 高效液相色谱仪,SPD26AV 紫外检测器

色谱条件 色谱柱:Shimpack CLC-ODS (150mm×6 mm )分析柱;国产YWGC18 (10mm×4.6mm) 保护柱;流动相:甲醇-水(95∶5);流速:1 m l/min;色谱柱温:35℃;检测波长:230nm。
试样制备:
 

对照品溶液的制备 精密称取人参二醇和人参三醇对照品约10mg,分别置25m l量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,得对照品贮备液。精密吸取对照品贮备液1.00 ml,置同一具塞试管中,减压下用氮气流吹干,加35-DNB 20mg,无水吡啶0.3m l,置75水浴上回流1h,取出后减压下用氮气流吹干。残渣用四氢呋喃溶解,并转入5 ml量瓶中,稀释至刻度,摇匀,即得。

 供试品溶液的制备 1.精密称取红参粉约0.1g,加45%乙醇10m l,超声提取1h,转入15ml离心管中离心(4000 röm in) 5m in,残渣用45%乙醇各5ml 洗涤二次。合并上清液于50ml 烧瓶中,加浓硫酸2.0ml,置75水浴上回流4h,转入蒸发皿中,浓缩至约10ml,取下,于冷水浴上滴加6mol/L N aOH 中和至pH67,转入分液漏斗中,用环己烷提取三次,每次15 m l。合并环己烷层,加无水N a2SO 4 2g脱水滤过,用少许环己烷洗涤滤渣,浓缩至近干,转入具塞试管中,用少许环己烷洗涤蒸发皿,洗液并入试管中,减压下用氮气流吹干,加35-DNB20 mg,无水吡啶0.3ml,置75水浴上回流1h,取出后,减压下用氮气流吹干。残渣用四氢呋喃溶解,并转入5ml量瓶中,稀释至刻度,摇匀,即得。

2.精密吸取生脉注射液1ml,加水9ml,无水乙醇9ml,再加入浓硫酸2.0ml,置75℃水浴上回流水解,其余操作与红参供试品溶液制备相同,即得。
操作步骤:
  将对照品溶液和供试溶液各5~10 μl 分别注入色谱仪,依上述色谱条件,测定峰面积,按外标法计算。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  李章万,徐秀荣,冯春琼等. 高效液相色谱衍生化法测定红参及生脉注射液中人参二醇和人参三醇的含量. 华西药学杂志. 1999,14 (4) ∶271~273
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