翻白草-熊果酸含量的测定-HPLC-DAD-中药质量控制方法 -

方法名称：

翻白草-熊果酸含量的测定-HPLC-DAD

应用范围：

用于翻白草中熊果酸含量的测定

方法原理：

本品用70%的乙醇回流提取，提取液蒸干，用石油醚除杂，再用甲醇索氏提取，经液相色谱仪分离，在220nm测定，以外标法计算含量。

仪器设备及实验条件：

仪器设备 HPLC-MS ZQ型液相质谱仪，Waters型二极管阵列检测器；SPD数据处理系统（美国waters公司).

色谱条件色谱柱：Waters symmetry shield^IMRP18柱（150mm×21mm，3.5μm)；流动相：甲醇-水-醋酸（94:6:0.05)；流速： 0.2 mL·min^-1 ；检测波长: 220nm；柱温:室温；扫描波长范围：190～400nm 。

试样制备：

对照品溶液的制备精密称取熊果酸对照品1.3mg，置2ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释定容至刻度，摇匀，得浓度为0.65mg/ml的熊果酸对照品贮备液,。吸取一定量的贮备液，配制成浓度为0.065μg/ml的对照品溶液。

供试品溶液的制备称取一定量翻白草和根的粗品，用70%乙醇（料液比为1：12，水浴回流时间2.5h，回流提取4次，合并滤液，用旋转蒸发仪蒸至无醇味，回收乙醇，将流浸膏放至蒸发皿中，加入4g硅藻土，混合均匀，水浴蒸干。将干燥物在70～80℃烘箱中烘干，得浸膏。将浸膏置干燥碘量瓶，超声除杂2次，每次加石油醚30mL，处理15 min。回收石油醚后，常温下晾干固体。将固体转移至索氏提取器中，加250 mL甲醇提取4h.将提取液减压蒸至50 mL，定容，移取样品10 mL，离心处理20min(16000r/min)，用微孔滤膜（0.22μm)过滤，移取40μL，用甲醇稀释至800μL，备用。

操作步骤：

取对照品和供试品溶液各5μL，注入高效液相色谱仪，在拟定的色谱条件下测定峰面积，以外标法熊果酸的含量。

附件：

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备注：

参考文献：

张颖，张立木，齐永秀等. 高效液相色谱法测定翻白草中熊果酸含量. 中国药业.2006.15(16):20～21

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