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盾叶薯蓣细胞—薯蓣皂甙元的含量测定-HPLC-UV
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方法名称:
  盾叶薯蓣细胞—薯蓣皂甙元的含量测定-HPLC-UV
应用范围:
  用于盾叶薯蓣细胞中薯蓣皂甙元的含量测定
方法原理:
 本品细粉加水解液回流提取,经正己烷萃取,用1%氢氧化钠溶液洗脱至无色,再用蒸馏水洗至无色,用无水乙醇溶解,蒸干,用甲醇定容,经液相色谱分离,在208nm处测定峰面积,以外标法计算含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备:美国ALL TECH高效液相色谱仪;UV 检测器。

色谱条件:色谱柱:Kromasil C-18 柱(250×4.6mm,5μm) ;柱温:室温;检测波长:208nm;流速:1.00mL/min;流动相:甲醇-水( 95:5)。
试样制备:
 

对照品溶液的制备  精密称取10.2 mg 薯蓣皂甙元标准品用分析纯甲醇定容至10 mL,溶液浓度为1.02mg/mL,薯蓣皂甙元浓度为0.969 mg/mL,用0.45 μm 微孔滤膜过滤,作为备用。

供试品溶液的制备  称取薯蓣细胞粉末约1g ,精密称定,置圆底烧瓶内,加入水解液( 2.5N硫酸70%异丙醇溶液),沸水浴回流提取8h,冷却,抽滤,除去残渣,滤液用正己烷萃取四次,合并,用1%氢氧化钠溶液洗脱至无色,再用蒸馏水洗至中性,减压蒸干,所得物质用无水乙醇洗出,于100mL烧杯中蒸干,得薯蓣总皂甙元粗提物,将薯蓣总皂甙元粗提物用分析纯甲醇定容至10mL,用0.45μm微孔滤膜过滤,备用。
操作步骤:
  精密吸取薯蓣皂甙元对照液以及供试品溶液20μL,分别注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积,以外标法计算含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  顾永明,袁丽红,李文谦等.RP-HPLC法测定盾叶薯蓣细胞中薯蓣皂甙元的含量.天然产物研究与开发.2004.16(4):331~333
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